糖尿病大鼠涎腺變化及NGF表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：注射四氧嘧啶建立糖尿病大鼠動(dòng)物模型，觀察糖尿病大鼠涎腺組織學(xué)變化過(guò)程，及免疫組織化學(xué)方法測(cè)定神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)在涎腺中表達(dá)的變化，探討糖尿病對(duì)涎腺分泌功能的影響。 材料與方法：選用健康雄性wistar大鼠40只，三月齡，體重200±20克，隨機(jī)分為兩組，對(duì)照組9只，實(shí)驗(yàn)組30只，將實(shí)驗(yàn)組大鼠腹腔注射四氧嘧啶，劑量為200mg/kg，建立糖尿病大鼠動(dòng)物模型。對(duì)照組注射等量生理鹽水，實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物分別在1個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月取

2、10只，與隨機(jī)選取的3只同期對(duì)照組大鼠進(jìn)行心臟灌注，取出一側(cè)腺體放入4﹪的多聚甲醛液中固定，常規(guī)HE染色和免疫組織化學(xué)染色光鏡下觀察并攝片；取另一側(cè)腺體放入2.5﹪戊二醛中固定，梯度酒精脫水，包埋，切片，JEM-1200EX透射電鏡下觀察并攝片。 結(jié)果：1.HE染色，光鏡下組織學(xué)觀察：在糖尿病狀態(tài)下，1個(gè)月、2個(gè)月時(shí)大鼠腮腺、頜下腺組織學(xué)出現(xiàn)變化，且隨病程的延長(zhǎng)組織學(xué)變化顯著，在3個(gè)月時(shí)光鏡下結(jié)構(gòu)有明顯的組織學(xué)改變，表現(xiàn)為腺葉萎

3、縮，間隙增寬，導(dǎo)管及各種腺泡有不同程度的萎縮，腺組織趨于減少，腺泡間紅染明顯，結(jié)締組織明顯增加。頜下腺顆粒曲管數(shù)目減少，細(xì)胞排列不整齊，呈簇狀堆積；舌下腺在組織學(xué)上的無(wú)明顯變化。 2.電鏡觀察結(jié)果：在糖尿病狀態(tài)下，大鼠腮腺、頜下腺超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)明顯變化，且隨病程延長(zhǎng)變化明顯，表現(xiàn)為細(xì)胞核固縮，染色質(zhì)濃縮，部分細(xì)胞膜斷裂，線粒體腫脹，嵴消失，基質(zhì)溶解呈空泡狀，線粒體膜斷裂，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)呈囊狀擴(kuò)張；舌下腺超微結(jié)構(gòu)變化不明顯。 3

4、.NGF免疫組織化學(xué)染色結(jié)果：NGF在正常及糖尿病頜下腺的腺泡中無(wú)表達(dá)，陽(yáng)性反應(yīng)見(jiàn)于顆粒曲管及紋狀管細(xì)胞，在1個(gè)月時(shí)表達(dá)減弱，實(shí)驗(yàn)組隨著病情的發(fā)展，在2個(gè)月、3個(gè)月時(shí)呈逐漸下降趨勢(shì)，有的甚去至無(wú)表達(dá)。在腮腺、舌下腺未見(jiàn)NGF陽(yáng)性表達(dá)。 結(jié)論：糖尿病可以引起腮腺、頜下腺一系列組織學(xué)變化，且隨病程的延長(zhǎng)而變化明顯；舌下腺無(wú)明顯變化；糖尿病可引起NGF在頜下腺表達(dá)降低，說(shuō)明頜下腺顆粒曲管細(xì)胞合成和分泌NGF的功能降低，而NGF缺乏與糖