糖尿病大鼠涎腺變化及NGF表達的實驗研究.pdf

1、目的：注射四氧嘧啶建立糖尿病大鼠動物模型，觀察糖尿病大鼠涎腺組織學變化過程，及免疫組織化學方法測定神經(jīng)生長因子(NGF)在涎腺中表達的變化，探討糖尿病對涎腺分泌功能的影響。 材料與方法：選用健康雄性wistar大鼠40只，三月齡，體重200±20克，隨機分為兩組，對照組9只，實驗組30只，將實驗組大鼠腹腔注射四氧嘧啶，劑量為200mg/kg，建立糖尿病大鼠動物模型。對照組注射等量生理鹽水，實驗組動物分別在1個月、2個月、3個月取

2、10只，與隨機選取的3只同期對照組大鼠進行心臟灌注，取出一側(cè)腺體放入4﹪的多聚甲醛液中固定，常規(guī)HE染色和免疫組織化學染色光鏡下觀察并攝片；取另一側(cè)腺體放入2.5﹪戊二醛中固定，梯度酒精脫水，包埋，切片，JEM-1200EX透射電鏡下觀察并攝片。 結(jié)果：1.HE染色，光鏡下組織學觀察：在糖尿病狀態(tài)下，1個月、2個月時大鼠腮腺、頜下腺組織學出現(xiàn)變化，且隨病程的延長組織學變化顯著，在3個月時光鏡下結(jié)構(gòu)有明顯的組織學改變，表現(xiàn)為腺葉萎

3、縮，間隙增寬，導(dǎo)管及各種腺泡有不同程度的萎縮，腺組織趨于減少，腺泡間紅染明顯，結(jié)締組織明顯增加。頜下腺顆粒曲管數(shù)目減少，細胞排列不整齊，呈簇狀堆積；舌下腺在組織學上的無明顯變化。 2.電鏡觀察結(jié)果：在糖尿病狀態(tài)下，大鼠腮腺、頜下腺超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)明顯變化，且隨病程延長變化明顯，表現(xiàn)為細胞核固縮，染色質(zhì)濃縮，部分細胞膜斷裂，線粒體腫脹，嵴消失，基質(zhì)溶解呈空泡狀，線粒體膜斷裂，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)呈囊狀擴張；舌下腺超微結(jié)構(gòu)變化不明顯。 3

4、.NGF免疫組織化學染色結(jié)果：NGF在正常及糖尿病頜下腺的腺泡中無表達，陽性反應(yīng)見于顆粒曲管及紋狀管細胞，在1個月時表達減弱，實驗組隨著病情的發(fā)展，在2個月、3個月時呈逐漸下降趨勢，有的甚去至無表達。在腮腺、舌下腺未見NGF陽性表達。 結(jié)論：糖尿病可以引起腮腺、頜下腺一系列組織學變化，且隨病程的延長而變化明顯；舌下腺無明顯變化；糖尿病可引起NGF在頜下腺表達降低，說明頜下腺顆粒曲管細胞合成和分泌NGF的功能降低，而NGF缺乏與糖