急性B淋巴細(xì)胞白血病微小殘留病的流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè).pdf

1、　　目的：建立并驗(yàn)證急性B淋巴細(xì)胞白血病(B-ALL)微小殘留病的三色流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)方法。
　　方法：應(yīng)用抗體組合CD10/CD20/CD19,CD10/TdT/CD19,CD34/CD38/CD19,CD34/CD22/CD19,CD34/CD45/CD19作為檢測(cè)白血病微小殘留病的探針,得出正常骨髓與B-ALL骨髓CD19+細(xì)胞流式細(xì)胞術(shù)散點(diǎn)圖特征,據(jù)此建立B-ALL微小殘留病三色流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)方法,用已知樣品稀釋實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證靈敏

2、度；對(duì)13份B-ALL初診骨髓樣品和22份緩解期骨髓樣品進(jìn)行檢測(cè),同時(shí)以多聚酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測(cè)IgH-CDRⅢ和TCRγ重排基因來評(píng)價(jià)該三色流式細(xì)胞術(shù)的檢測(cè)效果。
　　結(jié)果：1.CD19+細(xì)胞5種抗體組合流式散點(diǎn)圖特征：①正常人骨髓細(xì)胞在不同抗體組合流式散點(diǎn)圖上特征各異,但不同個(gè)體在同一抗體組合的散點(diǎn)圖上特征大致相似；②顯示正常CD19+細(xì)胞的成熟過程及各階段細(xì)胞比例；③B-ALL骨髓正常散點(diǎn)圖特征被破壞,獲完全緩解后正常骨髓

3、特征性散點(diǎn)圖可重現(xiàn)。2.殘留白血病細(xì)胞出現(xiàn)在正常骨髓特征性散點(diǎn)圖分布區(qū)之外,與初診時(shí)白血病細(xì)胞出現(xiàn)的位置相同。3.13份B-ALL初診骨髓標(biāo)本中,12份(92.3%)至少有一組抗原組合表達(dá)異常,最常見的異?？乖M合是CD10/CD20/CD19(61.5%)。4.檢測(cè)系統(tǒng)條件優(yōu)化后,對(duì)范圍在1：1~1：10000頻率的白血病細(xì)胞的檢出值與實(shí)際值有較好的相關(guān)性(r=0.83,P=0.00)。5.22份B-ALL緩解期骨髓標(biāo)本6份流式檢測(cè)陽