急性B淋巴細胞白血病微小殘留病的流式細胞術檢測.pdf

1、　　目的：建立并驗證急性B淋巴細胞白血病(B-ALL)微小殘留病的三色流式細胞術檢測方法。
　　方法：應用抗體組合CD10/CD20/CD19,CD10/TdT/CD19,CD34/CD38/CD19,CD34/CD22/CD19,CD34/CD45/CD19作為檢測白血病微小殘留病的探針,得出正常骨髓與B-ALL骨髓CD19+細胞流式細胞術散點圖特征,據此建立B-ALL微小殘留病三色流式細胞術檢測方法,用已知樣品稀釋實驗驗證靈敏

2、度；對13份B-ALL初診骨髓樣品和22份緩解期骨髓樣品進行檢測,同時以多聚酶鏈反應(PCR)檢測IgH-CDRⅢ和TCRγ重排基因來評價該三色流式細胞術的檢測效果。
　　結果：1.CD19+細胞5種抗體組合流式散點圖特征：①正常人骨髓細胞在不同抗體組合流式散點圖上特征各異,但不同個體在同一抗體組合的散點圖上特征大致相似；②顯示正常CD19+細胞的成熟過程及各階段細胞比例；③B-ALL骨髓正常散點圖特征被破壞,獲完全緩解后正常骨髓

3、特征性散點圖可重現。2.殘留白血病細胞出現在正常骨髓特征性散點圖分布區(qū)之外,與初診時白血病細胞出現的位置相同。3.13份B-ALL初診骨髓標本中,12份(92.3%)至少有一組抗原組合表達異常,最常見的異?？乖M合是CD10/CD20/CD19(61.5%)。4.檢測系統(tǒng)條件優(yōu)化后,對范圍在1：1~1：10000頻率的白血病細胞的檢出值與實際值有較好的相關性(r=0.83,P=0.00)。5.22份B-ALL緩解期骨髓標本6份流式檢測陽