鹽霉素選擇性靶向結(jié)直腸癌細(xì)胞的干細(xì)胞亞群并誘導(dǎo)間充質(zhì)上皮性轉(zhuǎn)換.pdf

1、目的：研究鹽霉素對結(jié)直腸癌(CRC)中癌癥干細(xì)胞(CSCs)的影響并初步探討其作用機制。
　　 方法：(1)體外鹽霉素與奧沙利鉑處理人類CRC細(xì)胞系H129和SW480，不同藥物處理后，細(xì)胞計數(shù)試劑盒8(CCK8)確定CRC細(xì)胞的存活性，并針對不同的藥物對細(xì)胞的作用繪制劑量反應(yīng)曲線；
　　 (2)鹽霉素與奧沙利鉑處理CRC細(xì)胞后，流式細(xì)胞術(shù)定量性分析CD133+細(xì)胞亞群比例，并進一步用軟瓊脂檢測功能性分析CRC細(xì)胞的克隆

2、球形成能力；
　　 (3)鹽霉素與奧沙利鉑處理CRC細(xì)胞后，transwell檢測分析CRC細(xì)胞的遷移及侵襲能力；
　　 (4)鹽霉素與奧沙利鉑處理CRC細(xì)胞后，采用Westernblot分析，免疫熒光染色，及real-time PCR分析，分別定性、定位、定量性檢測CRC細(xì)胞中上皮間充質(zhì)性轉(zhuǎn)換(EMT)的上皮性標(biāo)志物E-cadherin和間充質(zhì)性標(biāo)志物Vimentin的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：(1)相對于奧沙利

3、鉑，鹽霉素對人類CRC細(xì)胞H129和SW480顯示出更強的細(xì)胞毒性作用(IC50處比較，P<0.05)；
　　 (2)與奧沙利鉑相反，鹽霉素顯著性的降低了CD133+細(xì)胞亞群的比例(P<0.05)；并降低了CRC細(xì)胞的克隆球形成能力(P<0.05)；
　　 (3)與奧沙利鉑相反，鹽霉素顯著性的降低了CRC細(xì)胞的遷移和侵襲能力(P<0.05)；
　　 (4)與奧沙利鉑不同，鹽霉素顯著性的上調(diào)了MET的上皮性標(biāo)志物E