4EGI-1誘導(dǎo)結(jié)直腸癌細胞凋亡及其分子機制研究.pdf

1、結(jié)直腸癌(colorectal cancer, CRC)是常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一。據(jù)估計全世界范圍內(nèi)每年大約有新增病例1,360,000例，其中死亡達694,000例。2015年中國癌癥中心統(tǒng)計數(shù)據(jù)報導(dǎo)，結(jié)直腸癌的發(fā)病率以及致死率在所有惡性腫瘤中高居第五位。傳統(tǒng)結(jié)直腸癌治療手段，如放療與化療，對結(jié)直腸癌中晚期患者治療療效差，后期產(chǎn)生耐藥性且會對患者機體免疫系統(tǒng)造成傷害，給患者身心帶來痛苦。
　　真核細胞翻譯起始因子4E(euk

2、aryotic translation initiation factor4E, eIF4E)是真核生物帽狀依賴性蛋白質(zhì)翻譯起始階段的限速分子與翻譯調(diào)控的核心成分， eIF4E與真核細胞翻譯起始因子4G(eukaryotic translation initiation factor4G, eIF4G)、ATP依賴的RNA解旋酶eIF4A組裝形成的復(fù)合物eIF4F對與腫瘤細胞生長、增殖相關(guān)基因的表達起著關(guān)鍵的調(diào)控作用。eIF4E結(jié)合蛋白

3、1(eIF4E-binding protein1，4EBP1)通過與eIF4G競爭性結(jié)合eIF4E而負調(diào)控eIF4F的組裝。由于癌細胞依靠新生蛋白來維持快速生長，因此，靶向蛋白合成機制治療癌癥策略已引起廣泛關(guān)注。
　　小分子抑制劑4EGI-1因阻礙eIF4E與eIF4G的結(jié)合，同時促進4EBP1與eIF4E的結(jié)合，阻礙蛋白質(zhì)翻譯進程進而起到顯著的抗腫瘤效果。目前，4EGI-1已經(jīng)在乳腺癌、慢性淋巴細胞白血病、鼻咽癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤等不

4、同的腫瘤細胞中均被證實有抗腫瘤作用，而4EGI-1對結(jié)直腸癌的影響則鮮有報道，故本研究采用小分子抑制劑4EGI-1作用于結(jié)直腸癌細胞，探討了4EGI-1對結(jié)直腸癌細胞增殖、凋亡的影響及其作用的分子機制，以期為結(jié)直腸癌的靶向治療提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法：
　　1.用不同濃度的4EGI-1處理結(jié)直腸癌細胞，采用MTT、流式細胞術(shù)以及western blot技術(shù)檢測4EGI-1對結(jié)直腸癌細胞增殖，凋亡的影響。
　　2.用不同

5、濃度的4EGI-1處理結(jié)直腸癌細胞，采用Western blot技術(shù)檢測腫瘤凋亡相關(guān)蛋白cleaved-PARP, caspase-3, Bcl-2, Puma以及 Noxa等蛋白的表達。
　　3.免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation, Co-IP)的方法檢測4EGI-1對 eIF4E與eIF4G表達的影響。
　　結(jié)果：
　　1.4EGI-1抑制結(jié)直腸癌細胞增殖。
　　2.4EGI-1增強cl