富勒醇對血管生成的作用機制研究.pdf

1、研究背景:腫瘤血管生成與腫瘤生長、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)?？寡苌芍委煶蔀槎喾N實體腫瘤治療中的有效方案。富勒醇C60(OH)22是一種低細胞毒性納米材料,體內(nèi)研究顯示其具有抗腫瘤作用,機制包括免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤血管生成等,但它抗血管生成的作用機制尚不明確。既往研究顯示C60衍生物可以調(diào)控HDAC,而HDAC抑制劑通過下調(diào)HIF-1α、VEGF的表達從而抑制腫瘤血管生成。本課題進一步研究C60(OH)22是否通過調(diào)控HDAC而影響血管生成。

2、　　方法:通過檢測細胞活性(MTT法)來反映C60(OH)22對永生化人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞(HUVEC)增殖的影響。通過細胞侵襲實驗(Transwell法)和網(wǎng)格形成實驗來檢測C60(OH)22對體外HUVEC血管生成的影響。通過檢測C60(OH)22處理后細胞內(nèi)活性氧(ROS)以及HDAC1、HDAC2、HIF-1α、VEGF、RECK的表達和MMP2、MMP9酶活性的變化,并進一步通過干擾HDAC1或HDAC2的表達后檢測體外HUV

3、EC介導(dǎo)的血管生成、細胞內(nèi)ROS以及HIF-1α、VEGF、、RECK表達和MMP2、MMP9酶活性的變化,來研究C60(OH)22對血管生成的作用機制。通過裸鼠的Matrigel plug模型,進一步研究C60(OH)22對體內(nèi)血管生成及對HDAC1、HDAC2、HIF-1α、VEGF、MMP2、MMP9、RECK表達水平的影響。
　　結(jié)果:C60(OH)22能夠抑制血管內(nèi)皮細胞侵襲轉(zhuǎn)移和網(wǎng)格形成,但不影響細胞活性。C60(OH

4、)22能夠降低細胞內(nèi)ROS以及HDAC1、HDAC2、HIF-1α、VEGF的表達,并抑制MMP2、MMP9酶活性,但增加了RECK的表達。siRNA干擾HDAC1或HDAC2的表達,抑制了血管內(nèi)皮細胞侵襲和網(wǎng)格形成,降低了細胞內(nèi)ROS水平以及HIF-1α、VEGF的表達,并抑制了MMP2、MMP9酶活性,但增加了RECK的表達。體內(nèi)實驗顯示C60(OH)22處理后Matrigel plug中血管數(shù)明顯減少,HDAC1、HDAC2、HI