富勒醇對(duì)小鼠脾細(xì)胞作用的探究.pdf

1、富勒烯作為一種新型碳納米材料，以其獨(dú)特的化學(xué)物理性質(zhì)被廣泛應(yīng)用于各個(gè)學(xué)科。但是，富勒烯的疏水性使它在水中的溶解度十分有限，阻礙了它在生物領(lǐng)域中的應(yīng)用。最近發(fā)現(xiàn)，將羥基團(tuán)通過化學(xué)方法嵌入富勒烯中能制備出富勒醇，這種方法不僅能有效改善富勒烯的水溶性問題，還使富勒醇保留了富勒烯本身的抗氧化性、清除自由基、保護(hù)細(xì)胞等獨(dú)特生物活性。
　　本文首先采用四丁基氫氧化銨(TBAH)催化合成法制備了一種常見的水溶性富勒烯衍生物—富勒醇(C60(OH

2、)n)，并用紅外光譜、核磁共振及飛行時(shí)間質(zhì)譜等表征方法對(duì)制各樣品進(jìn)行了表征。再用富勒醇作用于D-半乳糖誘衰后的小鼠脾細(xì)胞，與之進(jìn)行共培養(yǎng)，研究了富勒醇對(duì)小鼠誘衰脾細(xì)胞作用，觀察了小鼠誘衰脾細(xì)胞在加入富勒醇作用后的存活率、富勒醇對(duì)誘衰小鼠脾細(xì)胞的自由基清除能力等。主要取得了以下的研究成果:
　　(1)制備了水溶性良好的富勒醇，適用于生物細(xì)胞實(shí)驗(yàn);
　　(2)提取分離了小鼠脾細(xì)胞，用倒置顯微鏡觀察到脾細(xì)胞的形態(tài)大多數(shù)呈圓形，用苔

3、盼藍(lán)染色法染色脾細(xì)胞，觀察到初提取的小鼠脾細(xì)胞中幾乎無死亡細(xì)胞;并用不同濃度的D-半乳糖誘衰小鼠脾細(xì)胞建立了衰老脾細(xì)胞模型，通過噻唑藍(lán)(MTT)法、細(xì)胞計(jì)數(shù)法選擇了水解濃度為10g/LD-半乳糖誘衰小鼠脾細(xì)胞48h以進(jìn)行下一步的富勒醇探索作用實(shí)驗(yàn);
　　(3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，用0.7mg/ml富勒醇作用于10g/LD-半乳糖衰老脾細(xì)胞模型，采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率，D-半乳糖衰老脾細(xì)胞模型組的脾細(xì)胞存活率為69.7％，富勒醇作用組

4、的脾細(xì)胞存活率為80.9％，證明富勒醇降低了衰老脾細(xì)胞的死亡率;采用超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒檢測(cè)，富勒醇作用組SOD值為7.7451±0.1064U/mg·prot，D-半乳糖衰老脾細(xì)胞模型組SOD值為4.4362±0.2643U/mg·prot，富勒醇作用組的SOD值高于D-半乳糖衰老脾細(xì)胞模型組，說明富勒醇能清除衰老脾細(xì)胞內(nèi)的自由基，具有抗氧化性;采用微量丙二醛(MDA)試劑盒檢測(cè)，富勒醇作用組的MDA含量為2.34±0.15