蝎毒對鋰-匹羅卡品癲癇大鼠抗癇作用及其GluR2表達的影響.pdf

1、目的:(1)比較性研究蝎毒(scorpion venom,SV)與丙戊酸(valproic acid,VPA)在氯化鋰-匹羅卡品癲癇(Lithium-PilocarpineSeizures,LPS)慢性點燃大鼠模型的抗癲癇作用；(2)觀察SV對LPS大鼠在慢性自發(fā)性發(fā)作期(14d～28d)GluR2在海馬CA1、CA3、齒狀回(Demme Gyrus,DG)區(qū)的表達,以探索SV對LPS大鼠海馬GluR2表達的影響及SV可能的抗癲癇作用機

2、制。
　　 方法:(1)106只清潔級健康成年雄性Spague-Dawley(SD)大鼠,100只用于制作鋰-匹羅卡品癲癇大鼠模型,6只作為正常對照組(n=6)。造模后大鼠隨機分為LPS模型組(n=40)、VPA干預組(n=20)、SV干預組(n=40)。各組均采用灌胃給予干預藥物,正常對照組、LPS模型組給予蒸餾水,VPA干預組給予丙戊酸(120mg·kg-1·d-1),SV干預組給予蝎毒(0.3mg·kg-1·d-1)；(2

3、)造模后各組大鼠隨機選取20只干預28天并進行行為學觀察,記錄14d～28d自發(fā)性發(fā)作的發(fā)作次數、發(fā)作級別,采用秩和檢驗進行統計；(3)剩余LPS模型組和SV干預組各20只根據干預天數隨機分為1d,3d,7d,14d,28d五個亞組(n=4),采用免疫組織化學技術測定正常對照組及各亞組大鼠海馬CA1、CA3、DG區(qū)GluR2的表達,通過圖像分析技術定量分析其動態(tài)變化和組間差異,采用方差分析進行統計分析。
　　 結果:(1)正常對

4、照組觀察期無癇性發(fā)作,LPS組急性期均有Ⅳ級以上癇性發(fā)作。SE后大鼠進入靜默期(7d～14d),之后模型組大鼠進入慢性癲癇自發(fā)性發(fā)作期(14d～28d),表現為癲癇的自發(fā)反復發(fā)作(spontaneous recurrent seizure,SRS)；(2)各個實驗組SRS的發(fā)作次數及發(fā)作級別比較,SV干預組與模型組比較,SV能顯著控制LPS大鼠的SRS的發(fā)作次數和降低發(fā)作級別(P<0.05)；(3)GluR2在正常對照組大鼠海馬CA1、

5、CA3區(qū)錐體細胞層及DG區(qū)顆粒細胞層均有明顯表達,可見較多GluR2-IR陽性細胞；(4)LPS模型組大鼠海馬各區(qū)的GluR2表達均明顯下調,并隨時間延長其下調愈加顯著。在各觀察時間點上與正常對照組相比較,差別均具有統計學意義(P<0.05)；(5)SV干預組與LPS模型組比較:在海馬CA1區(qū)和CA3區(qū)觀察到在1d時間點上兩組的GluR2表達接近,其后各點GluR2顯著上調,3d達峰值,3d后各觀察時間點其表達處于峰值后平穩(wěn)期,1d后各

6、觀察時間點與LPS模型組比較有顯著差異(P<0.05)；而在海馬DG區(qū)的GluR2表達兩組有類似趨勢,但較CA1區(qū)和CA3區(qū)的時間有延遲,且下降趨勢持續(xù)時間更短。第3d的時間點上兩組的GluR2表達值幾乎重疊,7d后差別逐漸明顯,LPS模型組繼續(xù)下降到第14天最低,以后第28d時表達與14d相近；(6)SV干預組與正常對照組比較,各觀察時間點GluR2表達弱于正常對照組,其差異具有統計學意義(P<0.05)。
　　 結論:(1)

7、SV在LPS模型中有顯著抗癲癇作用,能減少大鼠癇性發(fā)作頻率,降低發(fā)作級別；(2)SV抗癲癇作用與VPA干預后這一作用比較,無論在減弱發(fā)作級別和減少發(fā)作次數上,在本實驗所使用SV干預劑量情況下弱于VPA；(3)LPS癲癇模型鼠在各觀察時間點上GluR2表達均較正常對照組明顯下降。GluR2表達下降不論是癲癇發(fā)作的因為還是結果,提示都可能是癲癇發(fā)作相關的一個重要的機制或途徑；(4)SV干預組大鼠的癲癇發(fā)作得到有效控制,其海馬各區(qū)GluR2表