蝎毒對(duì)氯化鋰—匹羅卡品誘導(dǎo)大鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)模型的海馬GDNF mRNA表達(dá)的影響及意義.pdf

1、目的：(1)制作氯化鋰一匹羅卡品誘導(dǎo)大鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)(Lithium
　　chloride-Pilocarpine status epileptics，Li-Pilo SE)模型，比較性研究蝎毒(Scorpion venom，SV)及丙戊酸(Valprnica cid，VPA)干預(yù)對(duì)Li-Pilo
　　SE模型大鼠癲癇發(fā)作的行為學(xué)表現(xiàn)的影響及其在該模型中的抗癲癇作用；(2)分析經(jīng)SV、VPA干預(yù)后Li-Pilo SE模型大鼠

2、不同時(shí)間點(diǎn)海馬的膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子(Glial cell line-derived neurotroohic
　　factor，GDNF)mRNA表達(dá)水平的變化及推測(cè)可能的抗癲癇機(jī)制。
　　方法：(1)將清潔級(jí)健康雄性SD大鼠98只隨機(jī)分組，12只為對(duì)照組
　　(生理鹽水干預(yù)對(duì)照組6只和SV對(duì)照組6只)。余下86只大鼠進(jìn)行Li-Pilo SE造模，成功點(diǎn)燃64只(死亡4只)，未點(diǎn)燃成功22只，造模成功并存活大鼠6

3、0只，按隨機(jī)原則分為：癲癇模型組，n=20；VPA干預(yù)組，n=20；SV干預(yù)組，n=20。癲癇模型組、SV、VPA干預(yù)組大鼠分別在3h、6h、24h、3d、7d五個(gè)時(shí)間點(diǎn)處死(每個(gè)時(shí)間點(diǎn)n=4)；(2)癲癇造模成功后15分鐘，通過(guò)灌胃方式對(duì)各組進(jìn)行干預(yù)，SV對(duì)照組、SV干預(yù)組給予SV(0.3mg·kg-1·d-1)干預(yù)，VPA干預(yù)組給予VPA(120mg·kg-1·d-1)干預(yù)，生理鹽水干預(yù)對(duì)照組、癲癇模型組給予等量的生理鹽水干預(yù)，連續(xù)

4、治療7天。觀察7d內(nèi)各組大鼠的癇性發(fā)作次數(shù)、發(fā)作級(jí)別、持續(xù)時(shí)間及死亡情況；(3)使用原位雜交技術(shù)觀察各組大鼠3h、6h、24h、3d、7d的海馬GDNF mRNA陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)表達(dá)的變化，并進(jìn)行組間比較。
　　結(jié)果：(1)Li-Pilo SE模型大鼠行為學(xué)觀察結(jié)果：①大鼠模型點(diǎn)燃成功率為74.42％；模型組發(fā)作級(jí)別以Ⅲ～V級(jí)為主；②與癲癇模型組比較，SV、VPA干預(yù)組癇性發(fā)作級(jí)別顯著降低(P<0.05)，發(fā)作總次數(shù)顯著減少(P<0.0

5、5)。(2)Li-Pilo SE模型大鼠干預(yù)后各組大鼠海馬GDNF mRNA陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)的變化：①生理鹽水干預(yù)對(duì)照組和SV對(duì)照組GDNF mRNA陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在大鼠海馬各區(qū)均有少量表達(dá)，但二者之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；②3h癲癇模型組、SV、VPA干預(yù)組GDNF mRNA陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)表達(dá)較生理鹽水干預(yù)對(duì)照組呈現(xiàn)增高趨勢(shì)，但各組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；6hSV、VPA干預(yù)組GDNF mRNA陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)表達(dá)在CAl、CA3區(qū)

6、較癲癇模型組顯著增加(P<0.05)；三組DG區(qū)GDNF mRNA陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)表達(dá)量呈現(xiàn)增高趨勢(shì)，但兩兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；24hSV、VPA干預(yù)組GDNF mRNA陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)逐漸下調(diào)，但仍高于癲癇模型組，兩組與癲癇模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。觀察3d及7d，SV、VPA干預(yù)組大鼠海馬GDNF mRNA陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在各區(qū)的表達(dá)逐漸下調(diào)，兩者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，其中癲癇模型組于3d達(dá)峰值。<

7、br>　　結(jié)論：(1)SV、VPA對(duì)Li-Pilo SE模型大鼠癇性發(fā)作有顯著的抑制作用；(2)Li.Pilo SE模型鼠經(jīng)SV、VPA干預(yù)后GDNFmRNA陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在大鼠海馬各區(qū)的表達(dá)隨時(shí)間的推移呈動(dòng)態(tài)變化：于3h開(kāi)始上調(diào)，6h左右達(dá)峰值，此后表達(dá)逐漸下調(diào)。癲癇模型組則在3d表達(dá)量達(dá)峰值，較VPA、SV干預(yù)組峰值時(shí)間延遲，該結(jié)果提示在Li-Pilo SE模型中經(jīng)VPA、SV干預(yù)后可能有顯著的腦保護(hù)效應(yīng)，可能是兩者重要的發(fā)揮抗癲癇作用