轉(zhuǎn)化生長因子β受體Ⅱ?qū)ξ⑿l(wèi)星不穩(wěn)定結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡和遷移的影響.pdf

1、目的：研究轉(zhuǎn)化生長因子β受體Ⅱ（TGFβ RⅡ）表達(dá)對(duì)微衛(wèi)星不穩(wěn)定（MSI）結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡和遷移的影響。
　　方法：選擇野生型PIK3CA HCT116細(xì)胞（HCT116 wt）作為MSI結(jié)腸癌細(xì)胞模型；將TGFβRⅡ轉(zhuǎn)染HCT116 wt細(xì)胞獲得HCT116 wt-RⅡ細(xì)胞，并以HCT116 wt空質(zhì)粒細(xì)胞作為對(duì)照；通過生長因子缺失應(yīng)激（GFDS）誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。采用Western-blot檢測磷酸化 Smad2（TGFβ信號(hào)通路

2、關(guān)鍵因子）、磷酸化 AKT（PI3K/AKT信號(hào)通路關(guān)鍵因子）、Bim（TGFβ信號(hào)通路下游因子）和E-cadherin（誘導(dǎo)上皮向間質(zhì)轉(zhuǎn)化的標(biāo)志物）表達(dá)；采用DNA碎片ELISA分析檢測HCT116 wt-RⅡ細(xì)胞凋亡情況；通過Transwell實(shí)驗(yàn)檢測HCT116 wt-RⅡ細(xì)胞遷移活力。
　　結(jié)果：加入TGFβ后，HCT116 wt-RⅡ細(xì)胞的TGFβ信號(hào)通路得以啟動(dòng)（磷酸化Smad2增加），GFDS誘導(dǎo)的HCT116 wt

3、-RⅡ細(xì)胞凋亡受到顯著抑制（P<0.01），細(xì)胞遷移活力明顯增強(qiáng)（P<0.01）。PI3K抑制劑（LY294002）可以逆轉(zhuǎn)TGFβ對(duì)HCT116 wt-RⅡ細(xì)胞的凋亡抑制和遷移活力增強(qiáng)作用（P<0.01）。TGFβ作用于HCT116 wt-RⅡ細(xì)胞后，Bim和E-cadherin表達(dá)明顯減少（P<0.01）。
　　結(jié)論：TGFβ RⅡ在MSI結(jié)腸癌細(xì)胞中的再表達(dá)可以增加MSI結(jié)腸癌細(xì)胞的存活能力和遷移活力，該作用依賴PI3K/A