OTU1基因?qū)Y(jié)腸癌細胞生長的影響.pdf

1、去泛素化酶(Deubiquitinating enzymes，DUBs)是一類具有逆轉(zhuǎn)泛素化作用的蛋白酶。近年來研究發(fā)現(xiàn)，去泛素化酶不僅在細胞的正常生理活動中發(fā)揮重要作用，而且可能與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有密切關(guān)系。卵巢腫瘤相關(guān)蛋白酶1(OTUdomain-containing ubiquitin aldehyde-binding protein1，OTU1)是去泛素化酶家族成員之一，在腫瘤中具體作用及其作用機制還未明確。因此我們通過探討OT

2、U1在結(jié)腸癌發(fā)生、發(fā)展中的作用，從而進一步了解OTU1與人類腫瘤的關(guān)系。
　　方法：應(yīng)用實時定量PCR(Real-time PCR)和免疫組織化學(xué)技術(shù)，在mRNA和蛋白水平上檢測了OTU1在結(jié)腸癌組織中的表達情況。應(yīng)用質(zhì)粒載體經(jīng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染建立OTU1過表達細胞株，并應(yīng)用慢病毒載體系統(tǒng)建立了OTU1干擾細胞株;利用CCK-8實驗分析了OTU1過表達或干擾對結(jié)腸癌細胞生長的影響;Transwell和Matrigel膠穿實驗分析了其對結(jié)

3、腸癌細胞遷移和侵襲的影響。
　　研究結(jié)果顯示:結(jié)腸癌組織中OTU1 mRNA的表達量較其配對癌旁高3.5倍，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示OTU1蛋白在結(jié)腸癌組織中的高表達率明顯高于其相應(yīng)的癌旁正常粘膜組織，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=4.09，P＜0.05);其在結(jié)腸癌中的表達水平與患者的年齡、性別、有無遠處轉(zhuǎn)移、Duke's分期之間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);與腫瘤大小(P＜0.01)、腫瘤分期

4、(P＜0.01)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P＜0.01)密切相關(guān)，差異具有明顯的統(tǒng)計學(xué)意義;OTU1蛋白在癌旁正常粘膜-腺瘤-結(jié)腸癌中的表達呈遞增趨勢，高表達率分別為:11.11％、55.56％和77.78％，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。OTU1過表達能夠促進結(jié)腸癌細胞在體外的生長，促進結(jié)腸癌細胞的遷移和侵襲能力。反之，OTU1表達受干擾后，結(jié)腸癌細胞在體外的生長被抑制，遷移和侵襲能力減弱。
　　結(jié)論:OTU1的mRNA和蛋白水平均在