A型肉毒素對(duì)L5前根切斷大鼠模型中辣椒素受體表達(dá)的影響.pdf

1、[目的]
　　 評(píng)價(jià)A型肉毒毒素在L5前根切斷大鼠疼痛模型中的作用，并觀察該模型中腰段脊髓背角和背根神經(jīng)節(jié)上辣椒素受體表達(dá)的變化，探討A型肉毒毒素在該疼痛模型中緩解熱痛敏及機(jī)械痛敏可能的機(jī)制，為其臨床治療神經(jīng)病理性疼痛以求提供科學(xué)的理論依據(jù)。
　　 [方法]
　　 1.通過(guò)建立L5前根切斷的大鼠疼痛模型，在術(shù)后不同的時(shí)間點(diǎn)(術(shù)后3天、14天)，通過(guò)皮下給藥(A型肉毒毒素或辣椒素受體拮抗劑或生理鹽水)，在給藥前后做

2、行為學(xué)測(cè)試，跟正常對(duì)照組及假手術(shù)組對(duì)比，觀察大鼠機(jī)械痛敏及熱痛敏的變化。
　　 2.通過(guò)建立成功的L5前根切斷的大鼠疼痛模型，同時(shí)設(shè)假手術(shù)組(僅暴露左側(cè)脊髓，不做前根切斷)及對(duì)照組，在術(shù)后不同的時(shí)間點(diǎn)(術(shù)后1天、3天、7天、14天、21天)，行免疫熒光染色及western blotting，觀察腰段脊髓背角和背根神經(jīng)節(jié)上辣椒素受體的表達(dá)。
　　 3.比較在L5前根切斷的大鼠模型及假手術(shù)組模型上，在術(shù)后不同的時(shí)間點(diǎn)(術(shù)后3

3、、14天)，給予皮下注射A型肉毒毒素或辣椒素受體拮抗劑，在給藥后第3、7、14天行動(dòng)物取材做免疫熒光染色及western blotting，觀察腰段脊髓背角及背根神經(jīng)節(jié)辣椒素受體表達(dá)的變化。
　　 [結(jié)果]
　　 在皮下給予A型肉毒毒素，在術(shù)后3天、14天給藥，均有明顯的改善機(jī)械痛敏及熱痛敏的作用，以給藥后2周時(shí)鎮(zhèn)痛效果最顯著；給藥疼痛緩解程度在第7天起同側(cè)與對(duì)側(cè)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。免疫熒光染色結(jié)果：無(wú)藥物干預(yù)下，VR

4、T組在術(shù)后7天起與假手術(shù)組及對(duì)照組比較雙側(cè)L4及L5的背根神經(jīng)節(jié)的TRPV1表達(dá)明顯升高。術(shù)后21天升高最明顯。手術(shù)側(cè)TRPV1升高更明顯。相應(yīng)節(jié)段的脊髓背角上TRPV1表達(dá)也呈增加趨勢(shì)，跟對(duì)側(cè)對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。藥物干預(yù)組：3d模型組給BTX-A后，同側(cè)背根神經(jīng)節(jié)及脊髓背角的TRPV1表達(dá)在給藥后7天起明顯下降，對(duì)側(cè)表達(dá)也有下降，與假手術(shù)和對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；14d組變化趨勢(shì)跟3d組一致，但下降幅度較低；高劑量BTX-A(2

5、0u/kg)時(shí)TRPV1減少更具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。TRPV1受體拮抗劑SB366791能降低其表達(dá)，但需要連續(xù)用藥。western blotting結(jié)果顯示TRPV1變化趨勢(shì)與免疫熒光染色受體表達(dá)的變化一致。
　　 [結(jié)論]
　　 皮下注射A型肉毒毒素，能改善L5前根切斷模型的大鼠的機(jī)械痛敏及熱痛敏；在該病理性疼痛模型中，在背根神經(jīng)節(jié)及相應(yīng)節(jié)段的脊髓背角TRPV1的表達(dá)呈升高趨勢(shì)；在術(shù)后不同時(shí)間皮下注射A型肉