辣椒素對(duì)膀胱癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的影響.pdf

1、背景:
　　膀胱癌是泌尿系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一。男性發(fā)病率是女性的4倍。由于近年來膀胱癌發(fā)病率的上升，現(xiàn)已被公認(rèn)為世界范圍內(nèi)的一個(gè)重要的公共健康問題，受到越來越多的關(guān)注。
　　辣椒素（Capsaicin）是一種從辣椒果實(shí)中提取出的高香草酸衍生物。辣椒素不僅可以作為一種腫瘤啟動(dòng)子或同致癌物的作用，也可以在某些癌癥模型中抑制腫瘤的發(fā)生發(fā)展。大量研究證實(shí)，辣椒素治療可以通過多種機(jī)制阻滯膀胱癌形成，誘導(dǎo)膀胱癌細(xì)胞生長(zhǎng)停滯和細(xì)胞凋亡

2、。
　　辣椒素促進(jìn)細(xì)胞的代謝活化和氧化應(yīng)激，這主要是由于過量活性氧(reactiveoxygen species，ROS)的產(chǎn)生所導(dǎo)致的。中等量的活性氧不但在誘導(dǎo)細(xì)胞的生長(zhǎng)停滯和凋亡中起作用，并在上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial mesenchymal transition，EMT)的進(jìn)程中發(fā)揮著極為重要的功能。核紅細(xì)胞相關(guān)因子2(nuclear erythroidrelated factor2，Nrf2)是調(diào)節(jié)氧化還原反應(yīng)的轉(zhuǎn)

3、錄因子，在抗氧化防御系統(tǒng)中扮演關(guān)鍵角色，可以誘導(dǎo)細(xì)胞保護(hù)蛋白的產(chǎn)生和維持細(xì)胞的氧化還原代謝平衡。
　　目的:
　　觀察不同濃度營(yíng)養(yǎng)復(fù)合辣椒素對(duì)人膀胱癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的影響，探討核因子易位相關(guān)因子2(Nrf2)信號(hào)通路在癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移過程中的作用。
　　方法:
　　培養(yǎng)人膀胱癌細(xì)胞系(RT112，253J)，觀察不同濃度辣椒素（0μmol/L，100μmol/L，200μmol/L）于不同時(shí)間(0h，12h，24

4、h)對(duì)人膀胱癌細(xì)胞的影響，通過MTT實(shí)驗(yàn)、Transwell實(shí)驗(yàn)、劃痕實(shí)驗(yàn)及Western Blot評(píng)估侵襲、遷移和上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化能力的改變。
　　結(jié)果:
　　辣椒素抑制人膀胱癌細(xì)胞株的增殖能力。用MTT法檢測(cè)分析細(xì)胞株的增殖能力，可以明顯看出，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖能力下降，具有劑量和時(shí)間依賴性。辣椒素抑制人膀胱癌細(xì)胞的遷移和侵襲力。通過劃痕實(shí)驗(yàn)觀察辣椒素刺激（0μmol/L，100μmol/L，200μmol/L）對(duì)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)能力

5、的影響。辣椒素濃度越高，作用時(shí)間越長(zhǎng)，劃痕愈合速度越慢。此外，我們通過Transwell實(shí)驗(yàn)評(píng)估細(xì)胞侵襲能力，結(jié)果顯示辣椒素能顯著抑制細(xì)胞侵襲作用，并呈劑量依賴性。與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組穿膜細(xì)胞下降了近90％。兩組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　為了進(jìn)一步研究辣椒素對(duì)人膀胱癌細(xì)胞株EMT的影響，我們通過Western-blot檢測(cè)EMT標(biāo)記物E-鈣黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)。在辣椒素作用下，E-cadh

6、erin表達(dá)升高而Vimentin表達(dá)下降。同時(shí)，Western-blot檢測(cè)證實(shí)實(shí)驗(yàn)組核Nrf2(n-nrf2)蛋白表達(dá)下調(diào)，而胞漿Nrf2(c-nrf2)表達(dá)上調(diào)，表達(dá)具有劑量依賴性和時(shí)間依賴性。
　　結(jié)論:
　　1辣椒素能夠抑制人膀胱癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲。
　　2.辣椒素可以誘導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化中的關(guān)鍵因子E-鈣黏素的表達(dá)，并抑制Vimentin
　　3.辣椒素抑制核因子易位相關(guān)因子2(Nrf2)的傳遞，具