黃芪及其提取物對(duì)體外培養(yǎng)大鼠肺成纖維細(xì)胞增殖及KGF、TNF-α表達(dá)的影響.pdf

1、目的：通過(guò)觀察黃芪及其提取物對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠肺成纖維細(xì)胞增殖及角化生長(zhǎng)因子(KGF)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)表達(dá)的影響，探討黃芪及其提取物治療肺纖維化的機(jī)制，并為開(kāi)發(fā)其有效成分提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：(1)將60只SPF級(jí)大鼠隨機(jī)分為黃芪煎液組，黃芪總皂苷組，黃芪總黃酮組，黃芪多糖組，地塞米松組，生理鹽水組等6組，制備血清。(2)分離、培養(yǎng)并鑒定大鼠肺成纖維細(xì)胞，選用生長(zhǎng)良好的3代細(xì)胞，分為6組：黃芪煎液組，黃芪總皂苷組，

2、黃芪總黃酮組，黃芪多糖組，地塞米松對(duì)照組，空白對(duì)照組，加入相應(yīng)血清。用形態(tài)學(xué)和免疫組化鑒定成纖維細(xì)胞；臺(tái)盼藍(lán)排斥試驗(yàn)法測(cè)定細(xì)胞活力；MTT法檢測(cè)細(xì)胞抑制率；免疫組化法檢測(cè)細(xì)胞中KGF的表達(dá)；ELJSA法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液中TNF-α的表達(dá)。 結(jié)果：(1)波形蛋白表達(dá)陽(yáng)性，結(jié)合組織來(lái)源與細(xì)胞生物學(xué)特性確認(rèn)為肺成纖維細(xì)胞；(2)0.4％臺(tái)盼藍(lán)測(cè)定細(xì)胞活力>95％；(3)在48～72小時(shí)，與空白對(duì)照組相比，黃芪煎液組，黃芪總皂苷組，黃芪總

3、黃酮組，地塞米松組對(duì)大鼠肺成纖維細(xì)胞增殖有明顯的抑制作用(P<0.01)，黃芪多糖組有抑制作用P<0.05)；與地塞米松組相比，黃芪煎液組，黃芪總皂苷組，黃芪總黃酮組無(wú)顯著差異(P>0.05)而黃芪多糖組抑制率較低P<0.05)；(4)與空白對(duì)照組相比，黃芪煎液組，黃芪總皂苷組，黃芪總黃酮組KGF表達(dá)明顯增強(qiáng)P<0.01)，黃芪多糖組及地塞米松組增強(qiáng)(P<0.05)；與地塞米松組相比，黃芪煎液組，黃芪總皂苷組，黃芪總黃酮組KGF表達(dá)較強(qiáng)

4、(P<0.05)而黃芪多糖組無(wú)顯著差異P>0.05)；(5)與空白對(duì)照組相比，黃芪煎液組，黃芪總皂苷組，黃芪總黃酮組TNF-α的表達(dá)很低P<0.01)，黃芪多糖組及地塞米松組表達(dá)低(P<0.05)；與地塞米松組相比，黃芪煎液組，黃芪總皂苷組，黃芪總黃酮組表達(dá)低(P<0.05)而黃芪多糖組無(wú)顯著差異(P>0.05)。 結(jié)論：1、黃芪及其提取物可以抑制大鼠肺成纖維細(xì)胞的增殖，其中黃芪煎液、黃芪總皂苷、黃芪總黃酮的效果明顯優(yōu)于黃芪多糖