丹玄口康對檳榔提取物刺激下口腔粘膜成纖維細(xì)胞增殖活性的影響.pdf

1、目的：運(yùn)用血清藥理學(xué)的方法，觀察丹玄口康含藥血清對檳榔提取物(ANE)刺激下的口腔粘膜成纖維細(xì)胞(FB)增殖活性及相關(guān)增殖因子表達(dá)的影響。 方法：1．將40只SD大鼠隨機(jī)分成5組，分別給予生理鹽水，雷公藤多甙片，丹玄口康片(小，中，大劑量)灌胃制備正常血清和含藥血清。2．運(yùn)用組織塊法進(jìn)行體外口腔粘膜成纖維細(xì)胞的常規(guī)培養(yǎng)，取第三或第四代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。(1)免疫細(xì)胞化學(xué)染色SP法鑒定口腔粘膜成纖維細(xì)胞。(2)將上述細(xì)胞接種后分為六組

2、，加入不同濃度的ANE(0、5、50、100、150、200ug/ml)作用48小時(shí)后，MTT法檢測細(xì)胞增殖，尋找ANE促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖的最佳濃度。(3)將細(xì)胞接種后分為六組：正常組，ANE刺激組，西藥對照組，丹玄口康組小、中、大劑量組，分別加入正常血清，含藥血清和100ug/ml的ANE，作用48小時(shí)后，MTT法檢測細(xì)胞增殖，記錄細(xì)胞的吸光度值(OD)：免疫細(xì)胞化學(xué)染色法檢測細(xì)胞PCNA的表達(dá)，并對檢測結(jié)果進(jìn)行圖像分析，記錄平均光密

3、度值(AO)。 結(jié)果：1.口腔粘膜成纖維細(xì)胞經(jīng)SP法染色可見波形蛋白表達(dá)陽性，而細(xì)胞角蛋白表達(dá)陰性。2.檳榔提取物干預(yù)48小時(shí)后，50ug/ml，100ug/ml組OD值明顯高于0 ug/ml組。3.西藥對照組，丹玄口康組OD值均低于ANE刺激組，丹玄口康中、大劑量組OD值和西藥對照組相比差異具有顯著性意義，丹玄口康小劑量組OD值與西藥對照組相比無顯著性差異。4．正常組，西藥對照組，丹玄1：2康中、大劑量組A0值與ANE刺激組相

4、比具有顯著性差異，丹玄口康中、大劑量組與西藥對照組相比具有顯著性差異。 結(jié)論： 1．在50ug／ml～100ug／ml的范圍內(nèi)檳榔提取物促進(jìn)口腔粘膜成纖維細(xì)胞增殖。 2．雷公藤多甙含藥血清抑制檳榔提取物作用下的口腔粘膜FB增殖及PCNA的表達(dá)。 3．丹玄口康含藥血清呈劑量依賴性的抑制檳榔提取物刺激下的口腔粘膜成纖維細(xì)胞增殖和PCNA的表達(dá)，能有效拮抗檳榔提取物對1：2腔粘膜成纖維細(xì)胞的促增殖作用，其作用優(yōu)