中國廣東漢族宮頸癌家系與HLA-Ⅱ類基因多態(tài)性的關聯(lián)性分析.pdf

1、宮頸癌(cervical cancer)是在世界范圍內女性發(fā)病率居于第二位的惡性腫瘤，高危型人乳頭狀瘤病毒(Human papillomavirus，HPV)的感染，是宮頸癌和宮頸上皮內瘤樣病變(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)的重要病因。超過90％的宮頸癌合并HPV的感染，然而大多數(shù)感染HPV的婦女并不發(fā)展成宮頸癌，感染可自然消退；另外，有少數(shù)宮頸癌患者并未合并有HPv的感染。這表明僅有H

2、PV的感染尚不足以導致宮頸癌的發(fā)生，遺傳與環(huán)境因素是宮頸癌發(fā)生的重要誘因。 近年來，國內外廣泛開展了宮頸癌宿主易感性的研究，大多數(shù)研究集中在人類白細胞抗原(human leukocyte antigen，HLA)復合體。人類的HLA系統(tǒng)，定位于第六號染色體短臂6p21.1-21.3，是免疫系統(tǒng)的重要組成部分，具有高度的多態(tài)性，是人類對疾病易感性的主要免疫遺傳學基礎。但到目前為止，對宮頸癌的易感基因和保護基因還未達成共識，而且HL

3、A具有種族和地域的差異。本課題組對廣東漢族人群的先期研究成果(病例-對照研究)顯示：在宮頸癌患者的HLA復合體中，DPB1*1301、DPB1*0202、DQB1*030302、DQB1*050301等位基因頻率較對照組為高，提示可能是廣東漢族人群宮頸癌患者發(fā)病的易感基因。DRB1*110101等位基因和DRB1*13-DQB1*06連鎖單倍型在宮頸癌中的頻率較對照組為低，提示可能對廣東漢族人群具有保護性作用。為了避免傳統(tǒng)的病例-對照研

4、究中由于混雜因素所造成的假陽性，我們在先期研究的基礎上進行基于家系的關聯(lián)性分析，把HLA-Ⅱ類基因作為宮頸癌可能的候選基因進行深入的研究。 材料和方法： 1、調查對象的來源： 收集2003年9月至2007年10月在中山大學附屬第二醫(yī)院婦產科就診的宮癌病人75例，平均年齡為35.1±7.2歲。確定為先證者后，再追蹤其父母和同胞共196人。所有實驗對象均為居住在廣東且自認祖籍為廣東的漢族人群，抽取其外周血3ml。

5、 2、實驗方法： 以PCR-SBT(sequencing based typing，SBT)為主的分型方法對實驗組HLA-Ⅱ類基因進行DNA序列測定和等位基因分型。等位基因頻率采用直接計數(shù)法。使用Arlequin31軟件包進行Hardy-Weinberg遺傳平衡檢驗。采用FBAT軟件對宮頸癌樣本進行基于家系的關聯(lián)分析，將測得的宮頸癌家系的基因型、患病狀態(tài)等輸入軟件。 結果： 1、DPB1、DQB1、DRB1等

6、位基因頻率廣東漢族75例宮頸癌先證者的HLA-Ⅱ類抗原多態(tài)性研究中共檢出78種等位基因，父母及同胞中共檢出72種等位基因。 1)宮頸癌組 宮頸癌組中檢出DPB1 34種等位基因。其中頻率較高的幾種為：DPB1*0501(28.87％)，DPB1*020102(14.67％)，DPB1*1301(12.00％)，DPB1*040101(5.33％)；DQB1與DRB1位點分別檢出20和24種等位基因，其中DQB1位點中頻率

7、最高的三種為：DQB1*050201(20.67％)，DQB1*030302(14.67％)，DQB1*030101(11.33％)，DRB1位點中頻率最高的三種為：DRB1*030101(21.33％)，DRB1*090102(16.67％)，DRB1*150101(10.33％)。 2)父母及同胞組 父母及同胞中DPB1位點有27種等位基因，其中DPB1*0501(28.87％)，DPB1*020102(17.24％

8、)，DPB1*2101(5.17％)，DPB1*030101(4.74％)，DPB1*040101(3.02％)的頻率較高。DQB1與DRB1位點分別檢出21和24種等位基因，其中DQB1位點中頻率最高的三種為：DQB1*050201(17.24％)，DQB1*030101(14.22％)，DQB1*030302(13.34％)；DRB1位點中頻率最高的三種為DRB1*030101(18.53％)，DRB1*090102(15.09％)

9、，DRB1*120201(11.21％)。 3)FBAT分析結果以加性遺傳模型分析，共發(fā)現(xiàn)4個等位基因可能會增加宮頸癌的發(fā)病風險，包括DQB1*030302(Z=3.463，P=0.0015350)和DQB1*0602(Z=-2.839，P=0.014523)、DRB1*150101(Z=2.002，P=0.035281)、DPB1*1301(Z=2.028，P=0.032577)。 2、DR-DQ連鎖單倍型 1)宮頸癌

10、組宮頸癌組的居于前三位的DR-DQ連鎖單倍型頻率：DRB1*090102-DQB1*030302(12.62％)，DRB1*150101-DQB1*060103(10.23％)，DRB1*120201-DQB1*030101(6.51％)。 2)父母及同胞組DR-DQ連鎖單倍型頻率最高的為：DRB1*120201-DQB1-03010I/0309(6.22％)，DRB1*030101-DQB1*0201(4.33％)，DRB1*

11、140101-DQB1*050201(3.02％)。 3)FBAT分析結果以加性遺傳模型分析，DRB1*150101-DQB1*060103(Z=2.132，P=0.032877)與增加宮頸癌的發(fā)病風險有關。 結論： HLA-Ⅱ類基因上的部分等位基因可能是廣東漢族人群宮頸癌的易感基因。DQB1*030302、DQB1*0602、DRB1*150101、DPB1*1301等位基因以及DRB1*150101-DQB1