HPV感染及HLA基因多態(tài)性與宮頸癌年輕化的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：探討人乳頭瘤病毒(HPV)16感染與宿主人類(lèi)白細(xì)胞抗原(HLA)一DRBl、HLA-I~B1等位基因和宮頸癌發(fā)病年齡的關(guān)系，找出導(dǎo)致宮頸癌患者年輕化趨勢(shì)的發(fā)病原因及其發(fā)生的HLA遺傳學(xué)背景。 方法：收集2005年1月至2005年12月期間在我院和麗水市中心醫(yī)院治療的宮頸癌患者65例(435歲31例，>35歲34例)。首先取微量宮頸癌組織，用DNA提取試劑盒提取人類(lèi)基因組DNA，采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)方法對(duì)3l例435歲

2、的年輕宮頸癌患者(實(shí)驗(yàn)組即年輕組)和34例>35歲宮頸癌患者(對(duì)照組)的手術(shù)后的宮頸標(biāo)本進(jìn)行HPVl6檢測(cè)，分析宮頸癌的HPV感染率以及比較兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組的HPV感染率。第二步則是采用聚合酶鏈反應(yīng)一序列特異性引物法(PCR—SSP)對(duì)前述65例宮頸癌標(biāo)本進(jìn)行HLA-DRBl，HLA—DQBl基因分型。 結(jié)果： 一．宮頸癌患者ItPVl6感染與宮頸癌患者年齡關(guān)系 65例宮頸癌患者中共檢HPVl6感染25例，HPVl6總

3、感染率為38．5％，其中，年輕組HPVl6陽(yáng)性者17例，占54．8％，對(duì)照組HPVl6陽(yáng)性者8例，占23．5％，兩組間HP~16感染率比較有顯著差異(P<0．05)。隨著HPVl6感染率升高，宮頸癌患病年齡愈加年輕化，提示HPVl6感染與宮頸癌年輕化有關(guān)。 二．HLA-DRBl、DQBl等位基因頻率和基因型頻率分布 1．所有的患者中，共檢出HLA—DRBl12種等位基因，33個(gè)等位基因型。等位基因的頻率在L5％～2L5％

4、之間，DRBI*04、*09、*11和*12等位基因的頻率較高(12．3％，12．3％，13．8％，2L5％)，DRBi*07、*13和*16等位基因的頻率較低(3．8％，L5％，1．5％)；檢出HLA—DQBl8種等位基因，22種基因型。其中HLA—DQBi*0601和DQBI*0301頻率最高，分別為17．7％、33．1％，以DQBi*0306頻率最低，僅檢出2例，頻率為L(zhǎng)5％。 2．在年輕組中，檢測(cè)出Ilia—BRBl11

5、個(gè)等位基因和1例DRB4*53基因，共有21種基因表現(xiàn)型，其中DRBi*04、DRBi*09和DRBi*i2的頻率最高(17．7％，16．1％，19．4％)；檢出8個(gè)HLA一DQBl等位基因，16種基因型，檢出率最高的是DQBI,0301(35．5％)，最低的是DQBI*0306(1．6％)。在對(duì)照組中，也只檢測(cè)出HLA—DRBln個(gè)等位基因，18種基因型，而基因頻率最高的是BRBI*12(23．5％)，DRBI*13則未檢出；HLA—

6、DQBl檢出8個(gè)等位基因，18種基因型，檢出率最高的也是DQBI*0301(30．9％)，最低的也是DQBi*0306(L5％)。 三．年輕組和對(duì)照組HLA-DRBl、DQB1等位基因頻率比較 對(duì)照組HLA-DQBi*0501等位基因頻率與年輕組相比顯著性增高(16．2％，L6％，X2=8．209，P=0．004)，OR=11．72(95％CIL473～94．107)，缺失DQBi*0501等位基因的年輕患者與攜帶此基因

7、的對(duì)照組相比，患子宮頸癌的危險(xiǎn)性增加近12倍。其它等位基因在兩組之間沒(méi)有顯著性差異，但是，雖然HLA—DRBI*04、*09、*11、．12和HLA—DQBi*0601、．0201、*0301在兩組之間沒(méi)有顯著性差異，但這些等位基因在所有宮頸癌患者中的表達(dá)率特別高，提示這些等位基因可能與宮頸癌的發(fā)病有密切的關(guān)系。 四．HPVl6感染及HLA多態(tài)性與宮頸癌發(fā)病年齡的關(guān)系 在年輕組17例HPV(+)患者中，HLA—DRBI*

8、12表達(dá)顯著增高，與組內(nèi)HPV(一)患者相比有顯著性差異(p=--O．027，0R=5．42，95％CIL07—27．27)，在所有的宮頸癌患者中，DRBi*12也高表達(dá)(10．7％)，但是與對(duì)照組HPV(+)患者相比沒(méi)有顯著性差異(P=0．746)，這說(shuō)明在攜帶此等位基因的年輕女性，HPVl6的易感性增加，并且合并HP~16感染后易進(jìn)一步發(fā)展為侵襲性癌癥。HLA—DQBl*0201位點(diǎn)在HPV(+)年輕患者中表達(dá)率較低，在組內(nèi)與HPV

9、(一)患者對(duì)比有差異(／KO．05，OR=O.00l，95％C10．10一O．793)，與對(duì)照組HPV(+)患者DQBI*0201表達(dá)相比也有顯著性差異(／KO．05，0R=O．067，95％C10．07—0．634)，提示在HPV(+)年輕婦女中HLA—DQBi*0201等位基因與宮頸癌呈負(fù)相關(guān)，而在年齡較大的HPV(+)患者中HLA—DQBi*020l與宮頸癌呈正相關(guān)，但其基因的作用還需要進(jìn)一步驗(yàn)證。其它等位基因在HPV(+)患者中

10、組內(nèi)和組間沒(méi)有顯著性差異，但是值得一提的是，HLA—DRBI*04在年輕組HPV(+)的患者中表達(dá)率很高(23．2％)，而在對(duì)照組HPV陽(yáng)性患者中則沒(méi)有檢測(cè)到DRBI*04的表達(dá)，因而認(rèn)為DRBI*04與年輕女性HPVl6感染有關(guān)，且感染后易導(dǎo)致癌變。 五．HLA單倍體和HPV感染與宮頸癌發(fā)病年齡的分析 對(duì)HLA單倍體的研究發(fā)現(xiàn)，兩組在表達(dá)率上沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但是在感染HPVl6的年輕患者當(dāng)中，單倍體DRBi*04-DQ

11、Bi*03表達(dá)率為23．5％，而該單倍體在對(duì)照組中卻沒(méi)有檢測(cè)到，與等位基因DRBi*04的表達(dá)情況一樣。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，單倍體DRBi*04-1~BI*03在HPV(+)患者中表達(dá)率顯著升高，可導(dǎo)致女性HPV易感性增加，本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果與之基本相符。 結(jié)論： 1．隨著年輕女性HP~16感染率的升高，宮頸癌發(fā)病年齡年輕化趨勢(shì)愈明顯，宮頸癌年輕化與HPVl6感染有關(guān)。因此，對(duì)HPV感染的高危人群應(yīng)加強(qiáng)監(jiān)測(cè)、隨訪(fǎng)，作到早診斷、早治療

12、。 2．年輕女性宮頸癌發(fā)病與等位基因HLA—DQBi*0501呈負(fù)相關(guān)，HLA—DQBi*0501等位基因?qū)δ贻p女性宮頸癌具有一定的保護(hù)作用。 3．在HPV(+)的年輕婦女中HLA—DQBi*020l等位基因與宮頸癌呈負(fù)相關(guān)，而在年齡較大的HPV(+)患者中HLA—DQBI*0201與宮頸癌呈正相關(guān)，但其基因的作用還需要進(jìn)一步驗(yàn)證。 4．宮頸癌發(fā)病年齡年輕化與HLA--DRBI*04，*12等位基因及單倍體HLA