兔各器官中TLRs表達(dá)譜以及脂多糖對(duì)母兔子宮中生殖激素受體表達(dá)的影響.pdf

1、脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)作為革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的主要成分，能引起與革蘭氏陰性菌感染相同的炎癥反應(yīng)。雌性動(dòng)物的生殖道直接開(kāi)口于外界環(huán)境中，因而更易引發(fā)感染，繼而引發(fā)一些列生殖紊亂，降低家畜繁殖力。下丘腦-垂體-卵巢調(diào)節(jié)軸構(gòu)成一個(gè)完整的神經(jīng)內(nèi)分泌生殖調(diào)節(jié)體系，其分泌的生殖激素對(duì)維持雌性動(dòng)物正常的生殖機(jī)能具有重要的作用。已有研究表明了LPS對(duì)生殖激素的影響，而其生物學(xué)效應(yīng)與各自受體密切相關(guān)，故本實(shí)驗(yàn)首先檢測(cè)Tol

2、l樣受體(Toll-like receptors，TLRs)在母兔呼吸、消化器官以及肝、脾、子宮等器官中的表達(dá)譜及表達(dá)水平，了解母兔各個(gè)器官的先天性免疫機(jī)制;同時(shí)用LPS處理母兔，模擬其在自然狀態(tài)下革蘭氏陰性菌感染，探究LPS引起的炎癥反應(yīng)狀態(tài)下，子宮中生殖激素受體:孕酮受體(Progesterone receptor,PR)、孕酮受體膜元件(Progesterone receptor membranecomponent，PGRMC)、

3、促性腺激素釋放激素受體(Gonadotropin releasing hormonereceptor, GnRHR)、促黃體生成素受體(Luteinizing hormone receptor, LHR)和雌激素受體β亞型（Estrogen Receptor beta-subunit，ER-β）的表達(dá)水平，揭示LPS對(duì)生殖激素受體的影響，為闡明LPS引起的生殖機(jī)能紊亂奠定理論基礎(chǔ)。
　　36只5～6月齡生理健康間情期的雌性新西蘭白

4、兔。4只(n=4)不做任何處理，作為0h，16只LPS組耳緣靜脈注射LPS（0.5mg/Kg，n=16），16只對(duì)照組注射相應(yīng)體積生理鹽水(n=16)，分別于注射后1.5、3、6和12h(n=4)宰殺。0h未處理(n=4)采集肺、氣管、小腸、胃、肝、脾、子宮角、子宮體、子宮頸、卵巢、輸卵管和下丘腦等組織，用于TLRs表達(dá)譜檢測(cè)和表達(dá)水平檢測(cè);LPS組和對(duì)照組收集子宮角、子宮體和子宮頸組織，用于生殖激素受體的熒光定量PCR檢測(cè)和免疫組化檢

5、測(cè)。
　　結(jié)果分析表明:(1)以肝為參照，TLR2在氣管中表達(dá)量高，在肺、小腸、胃、脾、卵巢和下丘腦表達(dá)量低(P＜0.05); TLR3在小腸和輸卵管中表達(dá)量高，在胃和下丘腦中表達(dá)量低(P＜0.05); TLR4在肺中表達(dá)量高，在氣管、小腸、脾、肝、卵巢、下丘腦和輸卵管中表達(dá)量低(P＜0.05); TLR5在肺、氣管和胃中表達(dá)量高，在脾中表達(dá)量低(P＜0.05); TLR6在肺，子宮角和子宮體表達(dá)量高，在脾和下丘腦表達(dá)量低(P＜0

6、.05); TLR8在肺和脾中表達(dá)量高，在小腸、胃、子宮角、子宮體、子宮頸、卵巢和輸卵管中表達(dá)量低(P＜0.05); TLR10在氣管和脾的表達(dá)量高，在小腸、胃、子宮角、子宮體、子宮頸、卵巢、下丘腦和輸卵管中表達(dá)量低(P＜0.05)。
　　(2) LPS能顯著下調(diào)PR在子宮角、子宮體和子宮頸中的mRNA水平(P＜0.05);對(duì)子宮角、子宮體和子宮頸上皮細(xì)胞中PR蛋白表達(dá)無(wú)影響。LPS可顯著下調(diào)子宮體和子宮頸中PGRMC mRNA水

7、平的表達(dá)量(P＜0.05);抑制子宮頸上皮細(xì)胞中PGRMC蛋白表達(dá)(P＜0.05)。LPS能顯著下調(diào)GnRHR在子宮角、子宮體和子宮頸中的mRNA水平表達(dá)量(P＜0.05)，改變其原有表達(dá)模式;對(duì)子宮角、子宮體和子宮頸上皮細(xì)胞中GnRHR蛋白表達(dá)無(wú)顯著差異(P＜0.05)。LPS能顯著下調(diào)LHR在子宮角、子宮體和子宮頸中的mRNA水平表達(dá)量(P＜0.05);改變LHR蛋白在子宮角、子宮體和子宮頸上皮細(xì)胞中的表達(dá)模式。LPS能改變ER-β