NHL中p53基因突變與MSI和LOH的關(guān)系研究.pdf

1、目的:研究p53基因突變與微衛(wèi)星不穩(wěn)定性在非霍奇金淋巴瘤發(fā)生發(fā)展中的作用，以及p53基因突變與微衛(wèi)星不穩(wěn)定性和雜合性缺失之間的關(guān)系。 方法:采用PCR-SSCP法對(duì)37例NHL進(jìn)行p53基因外顯子5-8的突變研究；選取p53基因內(nèi)部及基因周圍微衛(wèi)星位點(diǎn)D17S525、D17S520、D17S786、D17S1678檢測(cè)MSI和LOH情況。采用：DNA抽提試劑盒提取石蠟包埋組織基因組DNA、全血基因DNA-聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)

2、增-變性聚丙烯酰胺凝膠垂直電泳-銀染法-全自動(dòng)凝膠成像系統(tǒng)分析樣本。 結(jié)果:37例非霍奇金淋巴瘤中，p53基因總突變率為54.1％(20/37)。惰性組、侵襲性組和高侵襲性組突變率分別為0.0％(0/4)、58.1％(17/29)、100.0％(2/2)；T和NK細(xì)胞組和B細(xì)胞組突變率分別為37.5％(3/8)、58.6％(17/29)。MSI的總陽(yáng)性率為58.8％(21/37)，LOH的總陽(yáng)性率為51.4％(19/37)。位點(diǎn)

3、D17S520和D17S786的MSI陽(yáng)性組的p53的突變率明顯高于MSI陰性組(P值均小于0.05)。位點(diǎn)D17S525的MSI陽(yáng)性組的p53的第7外顯子突變率明顯高于MSI陰性組；位點(diǎn)D17S520的MSI陽(yáng)性組的p53的第7外顯子和第8外顯子突變率明顯高于MSI陰性組；位點(diǎn)D17S786的MSI陽(yáng)性組的p53的第6外顯子和第7外顯子突變率明顯高于MSI陰性組，P值均小于0.05。位點(diǎn)D17S520和D17S786的LOH陽(yáng)性組的p

4、53的突變率明顯高于LOH陰性組(P值均小于0.05)。位點(diǎn)D17S520的LOH陽(yáng)性組的p53的第5外顯子突變率明顯高于LOH陰性組：位點(diǎn)D17S786的LOH陽(yáng)性組的p53的第8外顯子突變率明顯高于LOH陰性組，P值均小于0.05。 結(jié)論: ①非霍奇金淋巴瘤中，尤在侵襲性和高侵襲性非霍奇金淋巴瘤中存在p53基因的突變，p53的突變?cè)诙栊越M和侵襲性、高侵襲性組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可以認(rèn)為p53在侵襲性、高侵襲性組的突

5、變高于惰性組。p53基因的突變?cè)贜HL的發(fā)展演變中可能起重要作用。 ②非霍奇金淋巴瘤組織中存在MSI和LOH，MSI和LOH可能參與了非霍奇金淋巴瘤的發(fā)生發(fā)展； ③位點(diǎn)D17S520和D17S786可能是p53周圍與p53基因關(guān)系較為密切的微衛(wèi)星位點(diǎn)，p53基因可能是D17S520和D17S786微衛(wèi)星不穩(wěn)定的靶基因； ④不同位點(diǎn)MSI/LOH可能影響不同p53外顯子的突變：位點(diǎn)D17S520的微衛(wèi)星不穩(wěn)定可能與