血必凈對豬原位肝移植缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的:通過本實驗,探討血必凈對豬肝移植缺血再灌注損傷是否更具有保護(hù)作用及進(jìn)一步研究肝移植缺血再灌注損傷的機(jī)制,掌握相關(guān)肝移植技術(shù)。
　　材料與方法:
　　(1)健康巴馬小型豬25頭,隨機(jī)分為假手術(shù)組(A)、對照組(C)、實驗組(B)。
　　(2)B組行用血必凈注射液+UW液,而C組用不含血必凈注射液的UW液均持續(xù)低壓灌注20分鐘。A組同肝移植受體的肝臟游離方法,不作任何結(jié)扎及阻斷,不作肝切除。
　　(3)檢測動物

2、存活率、無肝期及手術(shù)時間。BeckmanCX7全自動生化分析儀行術(shù)前及術(shù)后第1、2、3、7天肝功能檢測:丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、總膽紅素(TBIL)。
　　(4)取肝組織行蘇木精-伊紅(HE)染色,光鏡觀察肝組織的病理改變。
　　(5)TUNEL法檢測肝細(xì)胞凋亡。
　　(6)肝組織超氧化物歧化酶(SOD)檢測:采用黃嘌呤氧化酶法。
　　(7)用免疫組織化學(xué)法檢測肝臟組織Bax、B

3、cl-xl的表達(dá),計算其比值。
　　(8)各組數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( x±s)表示,應(yīng)用SPSS18.0統(tǒng)計軟件包對檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,采用重復(fù)測量方差分析,再作兩兩比較,P<0.05具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果:(1)B組、C組無肝期及手術(shù)時間無差異(P>0.05)。
　　(2)術(shù)前B組、C組及A組各指標(biāo)[6]無明顯差異(P>0.05)。
　　(3)移植術(shù)后1、2、3、7天B組、C組血清ALT、AST、TBIL水平

4、較術(shù)前均明顯升高,但B組值比C組低,兩組每一天的值互相比較(P<0.05)。
　　(4)光鏡下觀察肝組織,C組隨著移植后時間的延長肝臟組織病理改變逐漸加重,肝小葉細(xì)胞明顯水腫,呈氣球樣改變,肝巨噬細(xì)胞細(xì)胞增多、吞噬活躍,易見點狀、灶狀壞死區(qū),匯管區(qū)明顯擴(kuò)大、水腫,存在炎癥單個核細(xì)胞浸潤;B組肝組織病變較對照組輕,隨著時間延長有所恢復(fù);A組肝組織無明顯改變。
　　(5) TUNEL法檢測肝細(xì)胞凋亡:A組肝組織凋亡細(xì)胞最少,B組

5、次之,C組最多,三組每一天的細(xì)胞凋亡率互相比較(P<0.05)。
　　(6)三組每一天的SOD活性值互相比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　(7)B組Bax/Bcl-xl比值低于C組(P<0.05)。
　　結(jié)論:1、血必凈通過提高SOD的活性,減輕炎癥反應(yīng),降低生化值,改善肝功能,對肝臟具有保護(hù)作用。
　　2、血必凈能調(diào)控Bax、Bcl-xl蛋白的表達(dá),降低它們的比值,抑制肝細(xì)胞凋亡,減輕病理改變,從而保護(hù)