吸入二氧化硫?qū)^敏性鼻炎小鼠影響的研究.pdf

1、本文研究目的：通過觀察SO<,2>吸入對過敏性鼻炎小鼠鼻黏膜表面活性蛋白D(SP-D)表達、鼻黏膜嗜酸粒細胞(Eos)浸潤、鼻腔灌洗液及外周血血清中白細胞介素-5(IL-5)和白細胞介素-13(IL-13)水平的影響，探討SO<,2>對呼吸道黏膜的毒性作用機理。 研究方法： 1．動物模型的制備昆明種純系雄性小鼠50只，隨機分成5組，每組10只，即對照組、鼻過敏組(AR組)、復合模型組(鼻過敏+三種不同濃度SO<,2>吸入

2、)。①AR組：以卵清蛋白(OVA)混懸液，腹腔內(nèi)注射，隔日1次，共7次。腹腔注射免疫完成后，每側(cè)鼻腔均以5％卵清蛋白局部激發(fā)，每日1次，共7次。②對照組：用生理鹽水代替卵清蛋白，方法和步驟同前。③復合模型組：分兩步進行。首先復制AR模型；然后在此基礎上進行SO<,2>吸入(即染毒)。每次染毒前先以5％卵清蛋白進行雙側(cè)鼻腔局部激發(fā)。然后把三組動物分別放入濃度為56mg/m<'2>，112mg/m<'3>，168mg/m<'3>的裝置中進行

3、動式染毒，連續(xù)進行7d，每天1次，每次4 h。 2．樣本的采集及檢測造模成功后各組動物在麻醉狀態(tài)下行內(nèi)眥靜脈采血，收集鼻腔灌洗液。采用間接酶聯(lián)免疫吸附試驗法(ELISA)檢測血清和鼻腔灌洗液中IL-5、IL-13水平；用石蠟包埋鼻面骨，進行連續(xù)切片，然后HE染色，計算機輔助光學顯微鏡下計算每平方毫米鼻竇黏膜中Eos的數(shù)量；應用免疫組化法檢測鼻粘膜中表面活性蛋白D(SP-D)的表達。 研究結(jié)果：鼻過敏組血清和鼻腔灌洗液中I

4、L-5、IL-13水平及鼻黏膜中Eos的密度明顯高于對照組(P均<0.01)。56mg/m<'3>SO<,2>吸入組血清和鼻腔灌洗液中IL-5、IL-13水平與AR組差異無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)；112mg/m<'3>和168mg/m<'3>SO<,2>吸入組血清及鼻腔灌洗液中IL-5、IL-13水平均明顯高于AR組(P<0.01或P<0.05)；112mg/m<'3>和168mg/m<'3>SO<,2>吸入組鼻黏膜浸潤Eos密度

5、明顯高于AR組(P均<0.01)。隨吸入SO<,2>濃度的增高，鼻黏膜中Eos浸潤密度、外周血血清中IL-5和IL-13水平及鼻腔灌洗液中IL-5和IL-13水平均增高，呈明顯的正相關(guān)， (r分別為0.887、0.894、0.874、0.894、0.891，且P均<0.01)。鼻粘膜中SP-D在56mg/m<'3>和112mg/m<'3>SO<,2>吸入組的表達均明顯高于AR組(P<0.05，P<0.01)，但168mg/m<'3>SO