辛伐他汀對1型糖尿病大鼠心肌病變中P-selectin的影響.pdf

1、目的：探討辛伐他汀對1型糖尿病大鼠心肌病變中P-選擇素(p-selectin)表達(dá)的影響及其對心肌病變的作用。
　　 方法：雄性Wistar大鼠54只，體重190～230g，隨機(jī)分為正常對照組(NC組，n=18只)、糖尿病組(DM組，n=18只)和辛伐他汀干預(yù)組(S組，n=18只)。禁食12小時(shí)后，糖尿病組與辛伐他汀干預(yù)組均應(yīng)用鏈脲佐菌素(STZ)55mg/kg溶于pH4.3，0.1mmol/L的枸櫞酸緩沖液中一次性腹腔注射誘導(dǎo)

2、糖尿病大鼠模型，NC組注射等體積的枸櫞酸緩沖液，72h后以連續(xù)三次隨機(jī)血糖≥16.7mmol/L為造模成功。成模1周后給藥，辛伐他汀干預(yù)組給予10mg.kg-1.d-1辛伐他汀生理鹽水混懸液灌胃，正常對照組和糖尿病組給予等體積生理鹽水灌胃。于實(shí)驗(yàn)的4周、8周和12周每組各取6只大鼠稱重，斷尾采血測定糖；麻醉后腔靜脈采血，分離血清，測定胰島素、P-selectin含量，實(shí)驗(yàn)?zāi)┣腥⌒呐K，去掉被膜，用濾紙吸干后稱重，測量心臟重量指數(shù)(心臟mg

3、/體重g)，并于左心室同一部位切取心肌，部分凍存于-70℃，反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)法測定心肌組織P-selectinmRNA；余部分以10％中性甲醛固定、脫水、石蠟包埋、制作病理切片，行HE染色光鏡下觀察心肌形態(tài)學(xué)改變和測定心肌細(xì)胞面積，免疫組化法測定心肌組織p-selectin含量。
　　 結(jié)果：
　　 1、注射STZ72小時(shí)后，糖尿病組和辛伐他汀干預(yù)組大鼠空腹血糖顯著升高，與正常對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

4、意義(P＜0.05)；糖尿病組和辛伐他汀干預(yù)組空腹胰島素顯著低于正常對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 2、同期與對照組比較，糖尿病組和辛伐他汀干預(yù)組心重指數(shù)及心肌細(xì)胞面積增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；辛伐他汀干預(yù)組與糖尿病組比較，心重指數(shù)及心肌細(xì)胞面積降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 3、同期與對照組比較，糖尿病組和辛伐他汀干預(yù)組血清P-selectin明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

5、P＜0.01)；辛伐他汀干預(yù)組與糖尿病組比較血清P-selectin降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 4、HE染色可見正常對照組大鼠心肌膠原纖維纖細(xì)、分布均勻、排列整齊，未見病理變化；同期與正常對照組相比，糖尿病組4周心肌細(xì)胞肥大、疏松樣變，肌原纖維排列紊亂；8周上述改變更為明顯，伴炎細(xì)胞浸潤，肌原纖維斷裂、心肌纖維間及間質(zhì)內(nèi)可見大量膠原纖維；12周病變進(jìn)一步加重肌原纖維斷裂、纖維化更明顯；辛伐他汀干預(yù)組隨著干預(yù)時(shí)

6、間的延長，上述改變逐漸減輕。
　　 5、同期與對照組比較，免疫組化法結(jié)果示：糖尿病組和辛伐他汀干預(yù)組大鼠心肌組織P-選擇素表達(dá)明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；辛伐他汀干預(yù)組與糖尿病組比較心肌組織P-選擇素表達(dá)降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 6、同期與對照組比較，RT-PCR結(jié)果顯示：糖尿病組和辛伐他汀干預(yù)組大鼠心肌組織中P-selectin的mRNA表達(dá)較正常對照組明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

7、P＜0.05)；辛伐他汀干預(yù)組與糖尿病組比較減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 7、糖尿病大鼠心肌組織P-選擇素所作的散點(diǎn)圖可見隨著P-選擇素表達(dá)量的增加，大鼠心重指數(shù)和心肌細(xì)胞面積逐漸升高。采用Pearson相關(guān)分析表明：糖尿病大鼠心肌組織P-選擇素的表達(dá)與心重指數(shù)(r1=0.895,P1＜0.01)和心肌細(xì)胞面積(r2=0.863,P2＜0.01)呈顯著正相關(guān)。
　　 結(jié)論：心肌組織中P-selectin