柚皮苷對糖尿病心肌病大鼠心肌超微結構及缺氧誘導因子1α的影響.pdf

1、目的:
　　觀察柚皮苷(Naringin)對糖尿病心肌病(Diabetic Cardiomyopathy，DCM)大鼠心肌超微結構及缺氧誘導因子1α(Hypoxia-inducible factor1α，HIF-1α)的影響，探討柚皮苷防治糖尿病心肌病可能的作用機制。
　　方法:
　　將50只雄性Wistar大鼠先隨機分為空白對照組(NC組，n=10)及模型組(M組，n=40)。M組予高糖高脂飼料喂養(yǎng)，建立具備胰島素抵

2、抗特征的糖尿病大鼠模型，第6周末一次性腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)30mg·kg-1;注射STZ72小時后檢測大鼠空腹血糖大于11.1 mmol/L認為是糖尿病模型造模成功。再將M組隨機分為模型對照組(MC組)、柚皮苷高劑量組(NaH組)、柚皮苷中劑量組(NaM組)和柚皮苷低劑量組（NaL組）。繼續(xù)予高糖高脂飼料喂養(yǎng)至實驗結束，同時柚皮苷各組每天早晨一次灌服Naringin(10、20、40 mg·kg-1·d-1)，NC組和MC組灌服

3、(1ml·kg-1·d-1)生理鹽水。從實驗開始每2周斷尾采血，檢測血糖、胰島素、血脂、肌鈣蛋白、腦鈉肽等指標。注射STZ6周后，心臟取血并測定心重指數(shù);光鏡觀察糖尿病大鼠心肌組織的病理改變;應用透射電鏡觀察心肌組織超微結構的改變;應用免疫組織化學方法檢測心肌細胞HIF-1α表達情況。
　　結果:
　　1.采用高糖高脂飼料喂養(yǎng)加小劑量STZ腹腔注射方法能成功建立DCM大鼠模型。
　　2.與NC組比較，MC組大鼠體重減輕

4、(P＜0.05);血糖水平及胰島素抵抗指數(shù)明顯升高(P＜0.01);TG、CHOL及LDL-c明顯升高(P＜0.05)。給予Naringin干預后，與MC組比較，隨著時間延長，Naringin高、中、低劑量組大鼠體重減輕改善(P＜0.05)，胰島素抵抗指數(shù)呈劑量依賴性下降(P＜0.01或P＜0.05);Naringin高、中劑量組血糖、TG、CHOL及LDL-c亦呈劑量依賴性下降(P＜0.05)。
　　3.糖尿病心肌病模型對照組大

5、鼠的心重指數(shù)、肌鈣蛋白及腦鈉肽與空白對照組相比明顯增高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);而給于柚皮苷干預后，高、中劑量組可使心重指數(shù)、肌鈣蛋白及腦鈉肽降低，與模型對照組比較有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，但仍高于空白對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。而低劑量組的心重指數(shù)下降不明顯，與模型對照組比較無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。
　　4.光鏡結果顯示:與空白對照組相比，模型對照組可見心肌纖維斷裂、肥大，甚至變性，發(fā)生空泡變，

6、細胞核固縮或者裂解，在心肌中還可見到局灶性纖維組織增生，炎細胞浸潤的現(xiàn)象;柚皮苷高、中劑量組可改善糖尿病心肌病的心肌組織病變，但柚皮苷低劑量組可見肌纖維排列紊亂，且可見肌束內(nèi)散在炎細胞，與模型對照組相比，改變不明顯。
　　5.電鏡觀察顯示:模型對照組心肌纖維排列紊亂，閏盤正常結構破壞、斷裂，肌節(jié)結構模糊不清，細胞核核膜完整性破壞，線粒體局灶性增生且腫脹明顯，間質(zhì)血管內(nèi)皮變薄。而給予柚皮苷干預后，柚皮苷高、中劑量組的心肌纖維排列變規(guī)

7、則，肌節(jié)結構尚清晰可見，細胞核及閏盤結構接近正常，間質(zhì)血管內(nèi)皮無明顯改變。但低劑量組仍見心肌纖維走形紊亂、肌節(jié)結構不清，閏盤略增大，可見融合現(xiàn)象;血管內(nèi)皮仍見腫脹。
　　6.NC組幾乎無HIF-1α表達，MC組極少量HIF-1α表達，而柚皮苷高、中、低劑量組的HIF-1α表達明顯增加。MC組與NC組相比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);而柚皮苷高、中、低劑量組與NC比較均具有統(tǒng)計學差異(P＜0.01);柚皮苷高、中劑量組與MC組

8、比較差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);柚皮苷低劑量組與MC組比較差異亦具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，與柚皮苷高劑量組比較有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。
　　結論:
　　1.高糖高脂飲食結合小劑量STZ腹腔注射方法可以成功建立DCM大鼠模型。
　　2.Naringin能改善DCM大鼠糖脂代謝紊亂及胰島素抵抗。Naringin能降低DCM大鼠心重指數(shù)、cTnI與BNP，減輕心肌損傷。光鏡及電鏡結果提示Naringin能