鎘或鉻脅迫對(duì)擬穴青蟹非特異性免疫的影響.pdf

1、運(yùn)用酶學(xué)分析方法和組織學(xué)技術(shù)，研究了水體中不同濃度Cd2+或Cr6+脅迫1d，3d，5d，7d，9d后對(duì)擬穴青蟹血細(xì)胞總數(shù)(THC)、免疫相關(guān)酶及鰓、肝胰腺顯微結(jié)構(gòu)等的影響，探討Cd2+或Cr6+脅迫下擬穴青蟹的免疫防御機(jī)制，以期為其健康養(yǎng)殖水質(zhì)管理提供理論指導(dǎo)，并為甲殼動(dòng)物環(huán)境免疫學(xué)研究積累基礎(chǔ)資料。本試驗(yàn)的主要結(jié)果和結(jié)論如下： 1．Cd2+或Cr6+脅迫對(duì)擬穴青蟹血細(xì)胞總數(shù)(THC)的影響 擬穴青蟹分別暴露于不同濃度

2、Cd2+或Cr6+水體中1d，3d，5d，7d，9d后，其血細(xì)胞總數(shù)(THC)發(fā)生了相應(yīng)的變化，且一定程度上存在時(shí)間劑量效應(yīng)關(guān)系。Cd2+或Cr6+脅迫1d后擬穴青蟹THC即顯著下降(P＜0.05)，變幅與Cd2+或Cr6+濃度呈正相關(guān)，且擬穴青蟹對(duì)Cd2+的反應(yīng)較Cr6+更靈敏，Cd2+抑制效應(yīng)較Cr6+持續(xù)性更長。隨著脅迫時(shí)間延長至9d后，Cr6+脅迫下擬穴青蟹THC可逐漸恢復(fù)至與對(duì)照組差異不顯著的狀態(tài)(P＞0.05)，然而0.07

3、5mg/L、0.1 m/L Cd2+組的擬穴青蟹THC仍被顯著抑制(P＜0.05)。 2．Cd2+或Cr6+脅迫對(duì)擬穴青蟹血清中免疫相關(guān)酶活性的影響 Cd2+或Cr6+脅迫對(duì)擬穴青蟹血清中免疫相關(guān)酶活性影響顯著(P＜0.05)。Cd2+或Cr6+脅迫均對(duì)擬穴青蟹血清酚氧化酶(PO)活性產(chǎn)生顯著抑制效應(yīng)(P＜0.05)，但劑量效應(yīng)關(guān)系不明顯。Cr6+處理組的抑制效應(yīng)1d后即表現(xiàn)出來，且持續(xù)時(shí)間較短；Ca2+處理組5d后才

4、表現(xiàn)出來，抑制效應(yīng)持續(xù)時(shí)間較長。Cd2+或Cr6+暴露對(duì)擬穴青蟹血清溶菌酶(UL)活性均具有激活效應(yīng)，0.075mg/L、0.1 mg/L Cd2+組和4.0 mg/L、8.0 mg/L Cr6+組對(duì)溶菌酶激活效應(yīng)顯著(P＜0.05)，Cd2+或Cr6+對(duì)血清中溶菌酶激活效應(yīng)存在時(shí)間效應(yīng)關(guān)系，隨著脅迫時(shí)間的延長，其激活效應(yīng)逐漸減弱。Cd2+或Cr6+脅迫均能對(duì)擬穴青蟹血清抗菌力(Uα)產(chǎn)生顯著抑制效應(yīng)(P＜0.05)，其中Cr6+的抑制

5、效應(yīng)強(qiáng)于Cd2+，并表現(xiàn)出時(shí)間劑量效應(yīng)關(guān)系。 3．Cd2+或Cr6+脅迫對(duì)擬穴青蟹組織、器官中免疫相關(guān)酶活性的影響 Cd2+或Cr6+暴露對(duì)擬穴青蟹不同組織、器官中免疫相關(guān)酶類活性影響顯著。Cd2+暴露1d后即對(duì)擬穴青蟹鰓中Ca2+—ATPase活性產(chǎn)生顯著抑制效應(yīng)(P＜0.05)，抑制程度與Cd2+濃度相關(guān)性不顯著(P＞0.05)；Cd2+對(duì)擬穴青蟹鰓中Na+，K+—ATPase活性的抑制效應(yīng)相對(duì)較弱，Ca2+-AT

6、Pase對(duì)Cd2+的敏感性較Na+，K+-ATPase強(qiáng)。擬穴青蟹鰓中Ca2+-ATPase、Na+，K+-ATPase活性在Cr6+暴露1d后即被顯著抑制(P＜0.05)，且發(fā)現(xiàn)隨脅迫時(shí)間的延長Cd2+或Cr6+均可誘導(dǎo)擬穴青蟹鰓中Ca2+-ATPase、Na+，K+-ATPase活性升高。Cd2+暴露可誘導(dǎo)擬穴青蟹血清、鰓、肝胰腺、肌肉中SOD活性顯著升高(P＜0.05)，其中肝胰腺中SOD反應(yīng)更靈敏。Cr6+暴露下擬穴青蟹血清、鰓

7、、肝胰腺、肌肉中SOD活性均可被顯著誘導(dǎo)升高(P＜0.05)，與Cd2+不同的是Cr6+脅迫下鰓中SOD反應(yīng)較靈敏。Cd2+脅迫可誘導(dǎo)擬穴青蟹鰓、肝胰腺、肌肉中ACP活性顯著升高(P＜0.05)，但Cr6+脅迫對(duì)擬穴青蟹肝胰腺、肌肉中ACP活性影響不顯著(P＞0.05)。Cd2+脅迫對(duì)擬穴青蟹鰓、肝胰腺、肌肉中AKP抑制效應(yīng)顯著(P＜0.05)，尤其是肝胰腺、肌肉。與Cd2+處理不同的是，Cr6+處理能刺激擬穴青蟹鰓、肝胰腺、肌肉中AK

8、P活性。 4．Cd2+或Cr6+脅迫對(duì)擬穴青蟹組織、器官顯微結(jié)構(gòu)的影響 Cd2+或Cr6+脅迫對(duì)擬穴青蟹組織、器官顯微結(jié)構(gòu)產(chǎn)生劑量-時(shí)間效應(yīng)。脅迫9d后，其顯微結(jié)構(gòu)發(fā)生了不同程度的改變。0.1mg/LCd2+暴露9d后，擬穴青蟹鰓葉出現(xiàn)一定程度增厚，血腔相對(duì)增大；肝胰腺細(xì)胞界限模糊。8.0mg/LCr6+暴露下，鰓葉相對(duì)增厚，上皮層破壞；肝胰腺中血細(xì)胞增多，肝小管基膜出現(xiàn)斷裂，界限模糊。 綜上所述，Cd2+或C