大豆異黃酮對(duì)大鼠下丘腦—垂體—脾臟ERα、NGF、IL-2、AR表達(dá)的影響.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)研究了大豆異黃酮(SI)對(duì)去卵巢大鼠下丘腦-垂體-脾臟內(nèi)雌激素受體-alpha(ERa)、神經(jīng)生長因子(NGF)、白細(xì)胞介素-2(IL-2)、雄激素受體(AR)蛋白和mRNA表達(dá)及分布的影響，探討ERα、NGF、IL-2和AR在下丘腦、垂體、脾臟中表達(dá)的意義及大豆異黃酮對(duì)下丘腦-垂體-脾臟中四種物質(zhì)的影響及其相互作用機(jī)制。并通過分離腸道內(nèi)容物來研究大豆異黃酮對(duì)腸道菌群的影響。 方法：將50只雌性青年大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)

2、組和去卵巢組，去卵巢組分別補(bǔ)充高、中、低、對(duì)照(溶劑)劑量大豆異黃酮，補(bǔ)充至2周和6周每組各宰殺5只，運(yùn)用免疫組織化學(xué)SABC法和寡核苷酸探針原位組織雜交方法，對(duì)大鼠的下丘腦、垂體、脾臟中ERa、NGF、IL-2、AR的表達(dá)和分布變化進(jìn)行研究，并運(yùn)用活菌計(jì)數(shù)法對(duì)腸道內(nèi)容物進(jìn)行初步研究。 結(jié)果： ①ERα、NGF、IL-2、AR蛋白和mRNA分布于下丘腦的弓狀核、背內(nèi)側(cè)核、腹內(nèi)側(cè)核、室周核和室旁核，表明ERα、NGF、IL

3、-2、AR在下丘腦發(fā)揮了廣泛的作用，而四種產(chǎn)物主要定位于細(xì)胞胞核和突起，少量存在于胞漿和胞膜中，表明內(nèi)源性雌激素主要通過經(jīng)典的核受體途徑進(jìn)行基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控，也有部分通過非基因組機(jī)制。去卵巢大鼠下丘腦各核團(tuán)中ERα、NGF、IL-2、AR的表達(dá)強(qiáng)度和陽性神經(jīng)元數(shù)目總趨勢(shì)是顯著降低，而補(bǔ)充SI后四種陽性產(chǎn)物的強(qiáng)度和數(shù)目均得到不同程度的回升，其中6H(6周高劑量)組基本恢復(fù)到假手術(shù)組水平，6L(6周低劑量)組僅有少許回升，6M(6周中劑量)組介

4、于兩者之間，2周各劑量組中僅在2H(2周高劑量)組有回升，表明SI可提高體內(nèi)雌激素水平，進(jìn)而促進(jìn)NGF、IL-2、AR的表達(dá)，在維持和保護(hù)下丘腦神經(jīng)元的結(jié)構(gòu)和功能中發(fā)揮了重要作用，而且這種作用存在時(shí)間和劑量的依賴性;另外ERα、NGF、IL-2、AR表達(dá)變化的相似性提示四者在SI對(duì)下丘腦的作用中是相互協(xié)調(diào)和聯(lián)系的。 ②ERα、NGF、IL-2、AR蛋白和mRNA在垂體前葉、中葉和后葉均有分布，且主要定位于胞核，胞膜和胞漿中很少，

5、表明ERα、NGF、IL-2、AR參與了垂體生理功能的發(fā)揮。去卵巢大鼠垂體中ERα、NGF、IL-2、AR的表達(dá)強(qiáng)度和陽性細(xì)胞數(shù)目均顯著下降，而且6C(6周去卵巢對(duì)照)組比2C(2周去卵巢對(duì)照)組下降更多。體外補(bǔ)充SI后，垂體ERα、NGF、IL-2、AR的表達(dá)強(qiáng)度和陽性細(xì)胞數(shù)目均有不同程度升高，其中6H組基本恢復(fù)至假手術(shù)組的水平，而2周各劑量組和6M、6L組僅有部分恢復(fù)或無明顯變化，且四者分布和強(qiáng)度的變化趨勢(shì)一致，表明SI在垂體結(jié)構(gòu)和

6、功能維持上發(fā)揮了重要作用，且存在時(shí)間和劑量的依賴性，也表明SI在垂體中的作用是相互協(xié)調(diào)和影響的。 ③脾臟中廣泛分布著ERα、NGF、IL-2、AR蛋白，主要分布于被膜下方的紅髓區(qū)，而在白髓僅有極少量分布，mRNA分布區(qū)域與蛋白表達(dá)基本一致，僅在量上存在差異，即mRNA較蛋白表達(dá)多，表明ERα、NGF、IL-2、AR參與了脾臟免疫調(diào)節(jié)功能的發(fā)揮。去卵巢大鼠脾臟中ERα、NGF、IL-2、AR的表達(dá)強(qiáng)度和陽性細(xì)胞數(shù)目均顯著下降，而且

7、隨著去除卵巢時(shí)間的延長下降更多。體外補(bǔ)充高劑量SI6周后，脾臟ERα、NGF、IL-2、AR的表達(dá)強(qiáng)度和陽性細(xì)胞數(shù)目基本恢復(fù)至假手術(shù)組的水平，而2周各劑量組和6M、6L組僅有部分恢復(fù)或無明顯變化，表明SI通過。ERα對(duì)脾臟內(nèi)NGF、IL-2、AR的表達(dá)有促進(jìn)作用，且存在時(shí)間和劑量的依賴性；而四者分布和強(qiáng)度的變化趨勢(shì)一致，表明SI在脾臟中的作用是相互協(xié)調(diào)和聯(lián)系的。 ④ERα、NGF、IL-2、AR蛋白和mRNA在下丘腦、垂體、脾臟