膽固醇對早老性癡呆轉基因動物模型APP加工及Aβ生成的影響.pdf

1、阿爾茨海默病(Alzheimer'sdisease，AD)是一種常見的中樞神經系統退行性變性疾病，其主要臨床表現為進行性記憶減退和認知障礙。AD的神經病理表現主要是海馬區(qū)和新皮質區(qū)彌散性的神經元丟失、神經纖維纏結和細胞外的類淀粉樣沉積。Aβ是一組由β淀粉樣前體蛋白(β-amyloidprecursorprotein，APP)降解產生的含39-43個氨基酸殘基的混合物。類淀粉樣蛋白假說認為Aβ的生成過多和細胞外Aβ沉積是AD發(fā)病最原始、最

2、重要的病因。目前很多流行病學資料顯示高血脂可能和AD的發(fā)病機制相關。高脂高膽固醇飲食已成為一個公認的AD危險因子，而且眾多流行病學調查以及體內、體外實驗均證明膽固醇水平對于APP代謝，Aβ產生具有重要調節(jié)意義。有人認為他汀類藥物作為一種目前應用最廣的降脂藥可以通過減少細胞的膽固醇水平減少Aβ的生成，但也有人認為他汀類藥物對AD的保護作用與其降低膽固醇的作用并不直接相關。 為了在體研究膽固醇對APP代謝及Aβ的生成中的作用以及他汀

3、類藥物是否具有AD保護作用，本實驗建立了不同血膽固醇濃度梯度的APP轉基因小鼠模型。36只APP轉基因陽性鼠被平均分為4組：①高脂飼料給藥組②正常飼料給藥組③高脂飼料安慰劑組④正常飼料安慰劑組；另有9只同窩陰性鼠設為⑤陰性對照組。分別給予高脂高膽固醇飼料或正常飼料喂養(yǎng)6個月后給予辛伐他汀或安慰劑灌胃28天，使各組動物出現不同血膽固醇梯度。WesternBlot檢測APP、C99、BACE、PS-1和Aβ42表達水平，免疫組織化學檢測Aβ

4、42表達差異，Bielschowsky改良法觀察早期老年斑，NADPH-d酶組織化學染色檢測腦組織NOS表達差異。 WesternBlot結果顯示：各組動物的APP表達量無明顯差異，說明膽固醇不會影響APP的表達水平。正常飼料給藥組和高脂飼料安慰劑組的PS-1表達增高，海馬CA2區(qū)Aβ42陽性細胞較正常飼料安慰劑組明顯升高，在這兩組動物中觀察到早期老年斑，且這兩組動物海馬區(qū)NOS表達較其他組明顯減少。其機制可能是異常的(過高或過

5、低)的血膽固醇水平可以促進γ分泌酶，而不是β分泌酶對APP的切割從而增加Aβ的生成，促成海馬區(qū)的神經病理損害。高脂血癥可能是AD的危險因素，過高的膽固醇水平增加γ分泌酶對APP的異常切割從而增加Aβ的生成。對血膽固醇水平偏高的動物進行他汀類藥物灌胃可以有效地降低其膽固醇水平，其機制可能是由于γ分泌酶和C99均定位在脂筏上，他汀類藥物通過解離γ分泌酶與脂筏的結合從而減少對APP的切割最終減少Aβ的生成。但是，對血膽固醇水平正常的動物進行他