福壽螺多糖的分離純化及其生物活性研究.pdf

1、目的：為深入研究動物多糖的藥用價值，對福壽螺多糖進行分離提純、結(jié)構(gòu)鑒定和生物活性的研究。 方法： 1．通過熱水浸提醇沉法提取出福壽螺粗多糖，在單因素分析(提取時間、提取次數(shù)、料液比、提取溫度)的基礎(chǔ)上進行L934正交分析，優(yōu)化提取條件。 2．福壽螺粗多糖經(jīng)過除蛋白、去雜質(zhì)、纖維素離子交換柱(DEAE-52)和葡聚糖凝膠柱(SephadexG-200)柱純化，通過紫外光譜分析法(UV)和高效液相色譜(HPLC)法分

2、析多糖純度。 3．結(jié)合HPLC、氣相色譜(GC)、紅外光譜(IR)、薄層色譜(TLC)等方法和化學(xué)分析法初步鑒定多糖的一級結(jié)構(gòu)及部分理化性質(zhì)。 4．通過體外抗氧化，體外對DNA的保護作用和體內(nèi)小鼠免疫抑制模型的免疫功能試驗，分析多糖的抗氧化和提高免疫力等活性。 結(jié)果： 1．正交試驗結(jié)果表明，多糖提取的最佳工藝為：溫度為90℃，固液比為1:90，時間為2 h。采用苯酚-硫酸法測定多糖的含量，最終測得福壽螺粗

3、多糖總糖含量為39.88％。 2．使用DEAE-52離子交換柱和葡聚糖凝膠sephadexG-200柱對福壽螺粗多糖進行分離純化，得到ASPS-Ⅰa和ASPS-Ⅱa兩種多糖組分。經(jīng)紫外光譜分析，在260nm和280 nm均無核酸和蛋白質(zhì)吸收峰。經(jīng)HPLC檢測，ASPS-Ⅰa有一個吸收峰，說明ASPS-Ⅰa為均一多糖，可對其進行組成和結(jié)構(gòu)分析。 3．ASPS-Ⅰa通過薄層層析法、紅外光譜儀、高效液相色譜儀和氣相色譜儀分析，

4、結(jié)果表明ASPS-Ⅰa具有多糖的特征吸收峰、單由葡萄糖組成、主鏈以α-吡喃糖苷鍵連接為主的多糖。 4．體外抗氧化實驗表明，福壽螺多糖具有較好的抗氧化作用，表現(xiàn)為：在多糖濃度為3.0 mg/mL時對羥自由基和對O2-的最高清除率分別達到75.07％和42.41％，在多糖濃度為5 mg/mL，對H2O2誘導(dǎo)的小鼠紅細胞氧化溶血的抑制率可達到56.7％，抗肝組織自發(fā)性脂質(zhì)過氧化作用抑制率可達到67.33％．福壽螺多糖對由自由基引起的D