乳酸菌胞外多糖的分離純化及其生物活性研究.pdf

1、本論文優(yōu)化了乳酸乳球菌乳亞種產(chǎn)胞外多糖（Exopolysaccharide，EPS）的培養(yǎng)條件，結(jié)果表明：在選擇BLX 培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，改進(jìn)培養(yǎng)基的成分（1L 培養(yǎng)基）：葡萄糖10.0g，果糖10.0g，蛋白胨12.5g，胰蛋白胨12.5g；最佳發(fā)酵條件：
　　 溫度35℃，初始pH 值為6.0，接種量3.0％（V/V），時(shí)間為24h。根據(jù)優(yōu)化的培養(yǎng)條件，胞外多糖的產(chǎn)量可達(dá)到950.488mg/L。
　　 采用內(nèi)壓式中空

2、纖維膜超濾裝置對(duì)乳酸乳球菌乳亞種發(fā)酵液中胞外多糖進(jìn)行超濾濃縮分離。結(jié)果表明：在操作壓力0.08MPa，操作溫度25℃的條件下，用分子量為50ku的膜超濾經(jīng)離心除菌的發(fā)酵液，發(fā)酵液的體積濃縮了5.04倍，而胞外多糖的含量從949.54mg/L 上升到4790mg/L。
　　 對(duì)乳酸乳球菌胞外多糖的提取和粗胞外多糖中蛋白質(zhì)的去除及脫色進(jìn)行了研究，選擇DA201-C 樹脂對(duì)胞外多糖溶液進(jìn)行脫色，TCA 除蛋白，再經(jīng)過(guò)濃縮、透析、DEA

3、E-纖維素離子交換柱層析和Sepharose CL-6B 凝膠柱層析使多糖得到純化，最后得到純化樣品EPS2。
　　 紅外光譜掃描分析了胞外多糖的結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)分離純化出來(lái)的EPS2 具有β糖苷鍵的特征吸收峰（908 cm-1）；將標(biāo)準(zhǔn)葡聚糖系列進(jìn)行柱層析得到其洗脫體積，以LgMW 對(duì)保留時(shí)間TR（Retention Time）進(jìn)行線性回歸，得到EPS2的分子量約為6.9×105；TLC 分析EPS2的單糖組成主要為果糖和鼠李糖；另

4、外還研究了胞外多糖的抑菌作用，胞外多糖對(duì)枯草桿菌的抑菌效果顯著，對(duì)大腸桿菌的抑菌效果不是很明顯。
　　 通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)小鼠血清和肝組織中的過(guò)氧化氫酶（catalase，CAT）活力、丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量、超氧化物歧化酶（super oxide dismutase,SOD）活力可知，灌胃胞外多糖組的小鼠與對(duì)照組小鼠相比，抗氧化能力顯著提高。
　　 研究了胞外多糖對(duì)由環(huán)磷酰胺引起免疫損傷的