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文檔簡介
1、研究目的:
測定慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)肝纖維化患者的血清干擾素γ(IFN-γ)基因啟動子甲基化和血清中IFN-γ水平,探討IFN-γ基因啟動子甲基化與肝纖維化的關系,從而揭示慢性乙型肝炎患者血清IFN-γ基因啟動子甲基化及其血清水平在臨床診治中的價值。
研究方法:
慢性乙型病毒性肝炎患者(chronic hepatitis B)42例,肝硬化(livercirrhos
2、is)病人14例,均為2011年5月至2012年3月在山東大學齊魯醫(yī)院肝病科住院病人,慢性乙型病毒性肝炎均為肝穿刺活檢病例,病理結果均來自于山東大學齊魯醫(yī)院病理科,病人依照2007年中華肝臟病學會肝纖維化學組制定的《肝纖維化診斷及療效評估共識》進行分期。慢性乙型肝炎、肝硬化診斷均符合2000年《病毒性肝炎防治方案》所制定的規(guī)定。正常對照10例,來自健康人群志愿者。用甲基化特異性PCR法(Methylation Specific PCR,
3、MSP)測定IFN-γ基因啟動子的甲基化狀態(tài),用酶聯免疫吸附法(ELISA)測定血清中IFN-γ的水平,以明確甲基化對其分泌水平的影響。用酶聯免疫吸附法(ELISA)測定血清中肝纖維指標Ⅲ型前膠原(PCⅢ)、Ⅳ型膠原(Ⅲ-C)、層粘連蛋白(LN)、透明質酸酶(HA)的水平,結合肝穿刺結果,明確慢性乙型病毒性肝炎患者肝纖維化的程度(肝纖維化程度分期診斷符合2000年西安會議上修訂的慢性肝炎的病理診斷標準)。統計學分析采用SPSS17.0軟
4、件包進行,結果用均數±標準差(x±s)表示,組間差異采用兩組獨立樣本資料的t檢驗或卡方檢驗,相關分析采用Pearson線性相關分析。P<0.05為差異具有統計學意義。
結果:
1.CHB患者組IFN-γ基因啟動子甲基化程度明顯高于正常人組(P<0.05);HC患者組IFN-γ基因啟動子甲基化程度明顯高于CHB患者組(P<0.05)。
2.CHB患者組中IFN-γ基因啟動子甲基化程度隨纖維化程度增高而顯著增高
5、(P<0.05),即S0<S1<S2<(S3+S4)。
3.CHB患者S0組病人血清IFN-γ水平低于正常人組,但無統計學差異(P>0.05),其余各組病人血清IFN-γ水平皆高于正常人組(P<0.05);HC患者組血清IFN-γ水平明顯高于正常人組(P<0.05);CHB患者組血清IFN-γ水平明顯低于HC患者組(P<0.05)。CHB各患者組與HC患者組中,甲基化組IFN-γ水平明顯低于非甲基化組(P<0.05)。正常人組
6、中IFN-γ水平在甲基化組與非甲基化組中沒有明顯差異(P>0.05)。
4.CHB患者組中血清IFN-γ濃度與纖維化程度分期無明顯相關性(P>0.05)。
5.CHB患者血清中肝纖維化指標(PCⅢ、Ⅳ-C、LN、HA)皆高于正常人組;HC患者血清中肝纖維化指標明顯高于CHB患者組(P<0.05)。
6.CHB患者組的血清中肝纖維化程度指標與纖維化程度之間的相關性無統計學差異(P>0.05)。
結論
7、:
1.CHB患者中IFN-γ基因啟動子甲基化程度隨纖維化程度增高而顯著升高。提示:IFN-γ基因啟動子異常的甲基化可能參與慢性乙型肝炎肝纖維化的進程,因此IFN-γ基因啟動子甲基化可以作為肝臟纖維化早期預警的生物標志物。
2.CHB患者血清中IFN-γ的濃度在相同纖維化程度組中,IFN-γ濃度隨著炎癥的加重而增加。提示:慢性乙型肝炎疾病進展過程中,炎癥反應過程中所產生的某些條件促進了IFN-γ的分泌,因而可作為判斷
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