弓形蟲(chóng)LDH-like MDH基因的克隆、表達(dá)、亞細(xì)胞定位和定點(diǎn)突變研究.pdf_第1頁(yè)
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1、本研究首次克隆了T.gondiiMDH的DNA序列、cDNA序列，對(duì)cDNA推導(dǎo)翻譯出的氨基酸序列進(jìn)行了一系列生物信息學(xué)分析，T.gondiiMDH確切命名應(yīng)為T.gondiiLDH-LikeMDH，進(jìn)化上T.gondiiMDH所處位置衍生于α-原細(xì)菌或營(yíng)光合作用細(xì)菌MDH的進(jìn)化分支，與α-原細(xì)菌或營(yíng)光合作用細(xì)菌MDH也隸屬LDH-LikeMDH相吻合。T.gondiiMDH在原核生物和真核細(xì)胞內(nèi)能分別進(jìn)行有效的融合表達(dá)和非融合表達(dá)。間

2、接定位試驗(yàn)表明T.gondiiMDH為胞漿定位。T.gondiiMDH-R89P突變體酶活性降低，Km值增大。T.gondiiMDH-H176L突變體酶活性幾乎為零。T.gondiiMDH與多數(shù)真核生物MDH尤其是和人各型MDH之間的異源性和低同源性(與人胞漿型MDH、線粒體型MDH、NADP+依賴型MDH的同源性分別為20.9％、25.9％、18.7％)，提示基于MDH作為藥靶篩選抗T.gondii藥具有可行性。另外本研究也為進(jìn)一步深

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