栽培一粒小麥不同Glu-Alx等位基因的分子鑒定.pdf

1、高分子量谷蛋白亞基(HMW-GS)是重要的種子貯藏蛋白，與普通小麥（Triticum aestivumL.，2n=6x=42，AABBDD）烘烤品質(zhì)密切相關(guān)。普通小麥Glu-A1x位點(diǎn)變異很少。二倍體栽培一粒小麥(Triticum monococcum ssp.monococcum，2n=2x=14，AmAm)是人類歷史上第一個(gè)小麥栽培種。本研究利用SDS-PAGE系統(tǒng)地分析了197份栽培一粒小麥的Glu-A1x等位基因變異，取得如下<

2、br>　　結(jié)果:
　　1、在197份栽培一粒小麥中，共檢測(cè)到10個(gè)Glu-A1x等位基因變異類型，其中7個(gè)是新的變異，即Glu-A1md、Glu-A1me、Glu-A1mf、 Glu-A1mg、Glu-A1mh、Glu-A1mi和Glu-A1mj。10個(gè)等位變異類型出現(xiàn)的頻率和分布地區(qū)高度可變，Glu-A1mg等位基因出現(xiàn)頻率最低（1份，0.5％），Glu-A1mc出現(xiàn)頻率最高(132份，67％)。其中，Glu-A1ma是沉默的，

3、在2份材料中被檢測(cè)到，其他的等位基因都是可表達(dá)的。出現(xiàn)頻率最高的Glu-A1mc電泳遷移率與1Ax2*相似。
　　2、利用設(shè)計(jì)的2對(duì)特異性引物對(duì)10個(gè)Glu-A1x變異類型代表性材料分別擴(kuò)增Glu-A1x基因的兩端（片段1和片段2），并進(jìn)行測(cè)序。其中片段1包括信號(hào)肽、N端和重復(fù)區(qū)的前174個(gè)核苷酸;其中片段2包括重復(fù)區(qū)的最后210個(gè)核苷酸和C端。測(cè)序結(jié)果表明，片段1是477bp，而片段2是336bp，兩個(gè)片段在所有序列中都是大小相

4、同的。片段1和片段2的整合序列可在GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中查詢。
　　3、利用片段1和片段2的整合序列進(jìn)行了Glu-A1x基因的DNA序列多態(tài)性分析，共檢測(cè)到了18個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)(s)，其中片段1有10個(gè)，片段2有8個(gè)。這些突變位點(diǎn)中，有5個(gè)是同義突變，其他的13個(gè)都是非同義突變，包括6個(gè)重復(fù)區(qū)突變，而且C端的變異（4個(gè)突變）高于N端（2個(gè)突變）。
　　4、氨基酸序列分析結(jié)果表明，與普通小麥的Ax1和Ax2*亞基相比，Glu-A

5、1x基因除了存在單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphisms，SNPs）外，主要差異是存在于重復(fù)區(qū)的3個(gè)缺失/插入，其中片段1有1個(gè)(第137-142位氨基酸殘基，Pro-Gly-Gln-Gly-Gln-Gln)，片段2有2個(gè)（第6-10位氨基酸殘基，Gln-Gly-Gln-Gln-Gly;第46-50位氨基酸殘基，Ser-Gly-Gln-Gly-Gln)，可能影響小麥面粉的彈性。
　　5、栽培一