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文檔簡介
1、目的: 體外誘導分化內皮祖細胞(endothelial progenitor cells,EPCs),探討其生物學特性,觀察EPCs移植對慢性深靜脈血栓的治療作用,為慢性深靜脈血栓的治療提供一種新的思路。 方法: 1.密度梯度離心法獲取Wistar大鼠的骨髓單個核細胞(bone marrow-derived mononuclear cells,BMMNCs),內皮祖細胞培養(yǎng)基(EGM-2MV)體外誘導分化為EPC
2、s并進行鑒定。MTT比色法觀察其增殖能力。 2.采用結扎腎下段下腔靜脈結合注射凝血酶的方法建立大鼠深靜脈血栓模型,并飼養(yǎng)10 d以上。動物隨機分三組,經大鼠股靜脈穿刺注射移植液體。A組(n=25):EPCs移植組,移植1ml含有106個EPCs的細胞懸液;B組(n=25):EGM-2MV對照組,移植1ml培養(yǎng)基;C組(n=25):空白對照組,建立血栓模型后不做其他處理。 3.移植后分時間段取出血栓段下腔靜脈及血栓,應用免
3、疫組織化學法檢測各組血栓中新生血管及機化再通的情況。Western blot測定第14天各組血栓內血管內皮生長因子(VEGF)、堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)的蛋白表達變化。 4.采用SPSS13.0軟件進行分析。 結果: 體外成功誘導培養(yǎng)了大鼠骨髓源性EPCs,下腔靜脈造影顯示成功構建了大鼠慢性深靜脈血栓模型;vWF免疫組化顯示A組的血栓再通毛細血管密度明顯高于B、C組,B、C組之間差異無統(tǒng)計學意義;Wes
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