葉酸代謝信號通道與鼻咽癌耐藥的相關性研究.pdf

1、鼻咽癌是耳鼻咽喉頭頸部的常見惡性腫瘤，以放療為主，化療可以改善預后，但化療過程中容易產生腫瘤細胞對化療藥物的抵抗，鼻咽癌化療藥物抵抗是當前的熱點問題。本課題組前期研究發(fā)現，葉酸受體1基因在鼻咽癌化療藥物抵抗過程中起重要作用，因此探討葉酸受體及代謝信號通路，對闡明鼻咽癌化療藥物抵抗有重要意義。 目的： 研究葉酸代謝通路的關鍵酶葉酸受體基因1(FOLR1)、二氫葉酸還原酶(DHFR)、絲氨酸羥甲基轉移酶(SHMT)、胸苷酸合

2、成酶(TS)與鼻咽癌抵抗紫杉醇化療藥物的相關性，探討鼻咽癌抵抗化療藥物的分子機制。 方法： 1.采用集落形成實驗(colony formation assay)檢測葉酸對鼻咽癌親本細胞株CNE-1和相應的耐藥細胞株CNE-1/Taxol的影響。 2.以人鼻咽癌細胞株CNE-1、HNE-2細胞及相應的紫杉醇耐藥細胞株CNE-1/Taxol.、HNE-2/Taxol為研究對象，用逆轉錄多聚酶鏈式反應(RT-PCR)測

3、定葉酸代謝通路中關鍵酶FOLR1、DHFR、SHMT、TS在鼻咽癌親本細胞及耐藥細胞珠中的表達差異，觀察其與鼻咽癌耐藥的關系。 3.用免疫組化SP法檢測FOLR1在鼻咽癌組織與鼻咽正常組織中的表達差異。 結果： 1.乏葉酸培養(yǎng)的耐藥細胞的集落抑制率顯著高于乏葉酸培養(yǎng)的親本細胞集落抑制率(P<0.05)，耐藥細胞的生長比親本細胞更依賴于葉酸。 2.通過RT-PCR檢測了葉酸代謝通路關鍵酶FOLR1、DHFR

4、、SHMT、TS基因在鼻咽癌耐藥株CNE-1/Taxol和HNE-2/Taxol中的表達，發(fā)現FOLR1、DHFR和SHMT在耐藥株CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol中的表達顯著高于其相應的親本細胞CNE-1和HNE-2，提示葉酸代謝通路一些關鍵酶的變化可能與鼻咽癌抵抗紫杉醇化療藥物具有相關性。 3.FOLR1在正常鼻咽組織中無表達，而在鼻咽癌組織中有較低的陽性表達率，其陽性細胞數從0-42％不等，平均(23.85±