5-溴尿嘧啶用于中國對蝦誘變育種的初步研究.pdf

1、通過遺傳改良提高中國對蝦的生長、抗病力等經濟性狀表現是對蝦育種研究的主要目標。誘變育種(mutation breeding)具有育種周期短、基因突變頻率高、方法簡便、能同時對多個性狀進行改良等優(yōu)點，在作物、微生物育種中已有廣泛應用，在水產動物育種中也有相關研究，但在對蝦中的應用還尚未見報道。本論文以5.溴尿嘧啶(5-Bromouracil，5-BrUra)為化學誘變劑，探索了5-溴尿嘧啶處理中國對蝦受精卵的使用條件，研究分析了5-溴尿嘧

2、啶誘變處理對中國對蝦的生長和抗病表現的影響，為對蝦的化學誘變育種研究摸索基礎條件和提供技術參數。主要研究結果如下： 利用不同濃度的5―溴尿嘧啶處理不同發(fā)育階段的中國對蝦受精卵，統(tǒng)計孵化率、成活率和變態(tài)率。根據統(tǒng)計學分析結果獲得最佳處理條件，探討5-溴尿嘧啶對中國對蝦幼體發(fā)育的影響。結果表明，以5-溴尿嘧啶處理中國對蝦受精卵，其最佳處理階段為處于原腸期的胚胎，接近半致死條件下的處理濃度和處理時間的組合分別為0.5mg／mL，6h、

3、0.3mg／mL 15h和0.1mg／mL 24h；分別設置17℃、20°C和23℃三個溫度梯度，24、30和36三個鹽度梯度和7.6、8.1和8.6三個pH梯度，分析了溫度、鹽度、pH對5-溴尿嘧啶處理效果的影響。結果表明，溫度、鹽度對5-溴尿嘧啶的處理效果影響顯著，而pH對5-溴尿嘧啶的處理效果不存在顯著影響(P<0.05)；采用0.05mg／mL預處理處于原腸期的中國對蝦受精卵3h，0.5mg／mL后處理6h，其孵化率顯著高于僅用

4、0.5mg/mL處理6h的處理組，表明低濃度的5-溴尿嘧啶預處理可以顯著提高受精卵的孵化率；對幼體發(fā)育的觀察分析表明，5-溴尿嘧啶能影響中國對蝦幼體的前期發(fā)育，但不顯著影響溞Ⅲ至仔蝦期間的幼體發(fā)育，經5－溴尿嘧啶處理后孵化出來的幼體能夠正常變態(tài)。根據半致死條件下獲得的處理濃度和處理時間組合并對其略作調整，分別以0.3mg／mL 16h(記為0.3-16)和0.5mg／mL 9h(0.5-9)為處理濃度和處理時間批量處理中國對蝦受精卵，獲

5、得0.3-16和0.5-9兩個處理組。通過對蝦白斑綜合癥病毒(White Spot Syndrome Virus，WSSV)感染實驗，結果表明，對照組、0.3-16處理組和0.5-9處理組感染后的存活時間分別為(81.45±2.98)h、(74.57±2.88)h和(77.20±3.71)h。采用Kaplan-Meier方法對三個實驗組的存活率進行生存估計分析，對數秩檢驗(Log-Rank test)結果表明，處理組與對照組在各時間點上

6、的累計存活率不存在顯著差異，說明在本實驗條件下5-溴尿嘧啶處理并不能提高中國對蝦對WSSV的抵抗能力。 將5-溴尿嘧啶處理組和對照組的中國對蝦混養(yǎng)，測定頭胸甲長(CL)、頭胸甲寬(CW)、2-3腹節(jié)長(A2-3L)、2-3腹節(jié)寬(A2-3W)、體長(BL)、體重(W)6個指標，計算了各性狀間的相關系數。采用通徑分析方法對各性狀的影響大小進行剖分。結果表明，在對照組中，頭胸甲長對體重的直接影響最大，而在0.3-16、0.5-9處理

7、組中，體長對體重的直接影響最大。經顯著性分析，剔除與體重多元相關不顯著的性狀，分別建立了體重與剩余性狀的回歸方程：對照組為Y=0.985X1+2.150X3+0.808X5-7.582；0.3-16處理組為Y=1.374X1+2.866X2+2.121X3+1.352X5-13.071；0.5-9處理組為Y=4.675X2+1.947X3+5.412X4+0.561X5-9.610。 定期取樣測量三個實驗組的體長和體重，計算體重