玉米幼芽提取物對(duì)小鼠皮膚膠原蛋白氧化損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制.pdf

1、目的：在H<,2>O<,2>和UVA所致氧化損傷條件下，研究玉米幼芽提取物(EMP)對(duì)小鼠皮膚組織及小鼠皮膚成纖維細(xì)胞膠原合成的影響，來探究其對(duì)皮膚氧化損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制。 方法：分離并培養(yǎng)小鼠皮膚成纖維細(xì)胞，建立H<,2>O<,2>和UVA致小鼠皮膚和小鼠皮膚成纖維細(xì)胞氧化損傷模型。試驗(yàn)設(shè)計(jì)分為4組：空白對(duì)照組、損傷模型組、0501號(hào)EMP保護(hù)組和0502號(hào)EMP保護(hù)組。生化法測(cè)定小鼠皮膚中羥脯氨酸含量，HE染色觀察小鼠皮

2、膚組織結(jié)構(gòu)變化，組織塊法分離培養(yǎng)小鼠皮膚成纖維細(xì)胞，MTT法測(cè)定體外培養(yǎng)小鼠皮膚成纖維細(xì)胞生長曲線，MTT法測(cè)定EMP對(duì)H<,2>O<,2>和UVA處理的小鼠皮膚成纖維細(xì)胞的生長活性的影響，RT-PCR法測(cè)定小鼠皮膚和小鼠皮膚成纖維細(xì)胞中Ⅰ、Ⅲ型前膠原及MMP-1、MMP-3 mRNA的相對(duì)表達(dá)量。 結(jié)果：在H<,2>O<,2>致氧化損傷狀態(tài)下，0501號(hào)EMP對(duì)小鼠皮膚組織結(jié)構(gòu)具有較好的保護(hù)作用，0502號(hào)EMP對(duì)小鼠皮膚組織

3、結(jié)構(gòu)也有一定的保護(hù)作用，但效果沒有0501號(hào)強(qiáng)；0501號(hào)EMP保護(hù)組和0502號(hào)EMP保護(hù)組小鼠皮膚中羥脯氨酸的含量分別是H<,2>O<,2>損傷組的3.9倍(P<0.01)和2倍(P<0.01)：MTT法測(cè)定小鼠皮膚成纖維細(xì)胞的活性顯示，0501號(hào)EMP保護(hù)組和0502號(hào)EMP保護(hù)組吸光值分別是H<,2>O<,2>損傷組的1.6倍(P<0.01)和1.5倍(P<0.01)；0501號(hào)EMP保護(hù)組和0502號(hào)EMP保護(hù)組小鼠皮膚中Ⅰ型

4、前膠原mRNA的表達(dá)分別是H<,2>O<,2>損傷組的2.4倍(P<0.01)和1.4倍(P<0.01)，Ⅲ型前膠原mRNA的表達(dá)分別是H<,2>O<,2>損傷組的15.4倍(P<0.01)和7倍(P<0.01)，MMP-1 mRNA的表達(dá)比H<,2>O<,2>損傷組分別下降37.1％(P<0.01)和16.2％(P<0.01)，MMP-3 mRNA的表達(dá)比H<,2>O<,2>損傷組分別下降20.8％(P<0.01)和13.8％(P<0

5、.01)；0501號(hào)EMP保護(hù)組和0502號(hào)EMP保護(hù)組小鼠皮膚成纖維細(xì)胞中Ⅰ型前膠原mRNA的表達(dá)分別是H<,2>O<,2>損傷組的3.5倍(P<0.01)和1.8倍，Ⅲ型前膠原mRNA的表達(dá)分別是H<,2>O<,2>損傷組的4.6倍(P<0.01)和3倍(P<0.01)，MMP-1 mRNA的表達(dá)比H<,2>O<,2>損傷組分別下降20.6％(P<0.01)和16.9％(P<0.01)，MMP-3 mRNA的表達(dá)比H<,2>O<,2

6、>損傷組分別下降41.3％(P<0.01)和15％(P<0.01)。在IJVA致氧化損傷狀態(tài)下，0501號(hào)EMP對(duì)小鼠皮膚組織結(jié)構(gòu)具有較好的保護(hù)作用，0502號(hào)EMP對(duì)小鼠皮膚組織結(jié)構(gòu)有部分保護(hù)作用；0501號(hào)EMP保護(hù)組和0502號(hào)EMP保護(hù)組小鼠皮膚中羥脯氨酸的含量分別是UVA損傷組的2.3倍(P<0.01)和1.8倍(P<0.01)；MTT法檢測(cè)顯示UVA照射小鼠皮膚成纖維細(xì)胞并未引起細(xì)胞活性改變；0501號(hào)EMP保護(hù)組和0502

7、號(hào)EMP保護(hù)組小鼠皮膚中Ⅰ型前膠原mRNA的表達(dá)分別是UVA損傷組的2倍(P<0.01)和1.75倍(P<0.01)，Ⅲ型前膠原mRNA的表達(dá)分別比UVA損傷組下降39.8％(P<0.01)和28.8％(P<0.01)，MMP-1 mRNA的表達(dá)比UVA損傷組分別下降29.5％(P<0.01)和9.3％(P<0.01)，MMP-3mRNA的表達(dá)比UVA損傷組分別下降43.3％(P<0.01)和19％(P<0.01)；0501號(hào)EMP保護(hù)

8、組和0502號(hào)EMP保護(hù)組小鼠皮膚成纖維細(xì)胞中Ⅰ型前膠原mRNA的表達(dá)分別是UVA損傷組的3倍(P<0.01)和2.4倍(P<0.01)，Ⅲ型前膠原mRNA的表達(dá)分別是UVA損傷組的1.2倍(P<0.01)和1.1倍(P<0.01)，MMP-1 mRNA的表達(dá)比UVA損傷組分別下降53.6％(P<0.01)和43.2％(P<0.01)，MMP-3 mRNA的表達(dá)比UVA損傷組分別下降32.3％(P<0.01)和15.6％(P<0.01)

9、。 結(jié)論：玉米幼芽提取物能提高體外培養(yǎng)小鼠皮膚成纖維細(xì)胞活性，抑制自由基對(duì)小鼠皮膚成纖維細(xì)胞膜相結(jié)構(gòu)的損傷，抑制自由基對(duì)羥基化酶的損傷作用，提高羥脯氨酸的含量，促進(jìn)膠原蛋白的基因表達(dá)，抑制基質(zhì)金屬蛋白酶的基因表達(dá)，保護(hù)皮膚組織中成纖維細(xì)胞免受氧化損傷從而維持皮膚組織的正常結(jié)構(gòu)。其機(jī)制與玉米幼芽提取物能夠清除自由基，保護(hù)細(xì)胞膜相結(jié)構(gòu)，保護(hù)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的正常功能，抑制自由基對(duì)DNA的損傷，影響基因表達(dá)活性有關(guān)。其中0501號(hào)玉米幼芽