RECK在盆腔臟器脫垂患者盆底組織中子宮主韌帶和陰道前壁中表達(dá)意義的研究.pdf

1、目的:檢測(cè)女性盆腔臟器脫垂(pop)患者子宮主韌帶和陰道前壁中RECK的表達(dá)，探討其表達(dá)變化與POP發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。
　　 材料與方法:
　　 一、材料
　　 40例POP患者的主韌帶、膨出陰道前壁組織及10例非脫垂患者的主韌帶及陰道前壁組織來(lái)自2009年3月到2010年3月間中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院婦科手術(shù)切除的組織。所有組織均經(jīng)福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋。
　　 二、主要試劑
　　 兔抗人RE

2、CK單克隆抗體購(gòu)自武漢博士德公司。S-P試劑盒及DAB顯色試劑盒均購(gòu)自北京中杉金橋生物公司。
　　 三、方法
　　 采用免疫組織化學(xué)染色方法，按鏈霉素抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶(S-P)法行免疫組織化學(xué)染色。切片常規(guī)脫蠟至水，高溫高壓進(jìn)行抗原修復(fù)，一抗4℃孵育過(guò)夜，DAB顯色，蘇木素復(fù)染。用PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。結(jié)果判定：細(xì)胞外基質(zhì)內(nèi)見(jiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性表達(dá)。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：應(yīng)用計(jì)算機(jī)圖像分析儀分析各組RECK免疫組織化學(xué)染

3、色的陽(yáng)性區(qū)平均灰度值。在圖像分析中，免疫組織化學(xué)染色的強(qiáng)弱與灰度值成正比關(guān)系，陽(yáng)性物質(zhì)越高，染色越深，灰度值越大。
　　 四、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
　　 采用SPSS13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。RECK蛋白表達(dá)和POP臨床病理特征的關(guān)系用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:RECK在盆底組織的表達(dá)陽(yáng)性呈黃色或棕黃色，主要定位于細(xì)胞外基質(zhì)，陽(yáng)性表達(dá)呈彌漫性分布，POP組和對(duì)照組患者盆底組織中均見(jiàn)RECK

4、陽(yáng)性表達(dá)，RECK在對(duì)照組的主韌帶及陰道壁平均灰度值(90.7±2.90;90.3士3.84)明顯高于Ⅱ度、Ⅲ度和Ⅳ度盆腔臟器脫垂患者（86.4士3.44，82.2±3.20，81.9±3.06;86.1士4.35，81.3士4.04，80.2士2.66），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在對(duì)照組的平均灰度值與Ⅰ度盆腔臟器脫垂者的平均灰度值未見(jiàn)明顯差異；Ⅲ度和Ⅳ度盆腔臟器脫垂患者中的主韌帶及陰道壁平均灰度值(82.2±3.20，81.9±3.06;8