CUS模型大鼠大腦白質(zhì)改變及氟西汀對其作用的研究.pdf

1、第一部分：CUS模型大鼠大腦白質(zhì)改變
　　目的：以慢性不可預(yù)知應(yīng)激模型大鼠為研究對象，運(yùn)用無偏體視學(xué)方法定量研究 CUS模型大鼠大腦白質(zhì)及白質(zhì)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維的改變情況，為研究抑郁癥的發(fā)病機(jī)制及治療手段提供新的靶點(diǎn)和切入點(diǎn)。
　　方法：選取4-5周齡，體質(zhì)量100-150 g的雄性SD大鼠120只，每5只為1籠，適應(yīng)性喂養(yǎng)2周。2周后，進(jìn)行糖水訓(xùn)練。待糖水基線穩(wěn)定后，根據(jù)糖水偏好實(shí)驗(yàn)淘汰糖水偏好水平低于糖水基線的大鼠。將剩余的

2、大鼠按成模率約30%配比，隨機(jī)分為對照組和 CUS組，其中對照組24只，CUS組72只。CUS組大鼠每只為1籠，給予4周慢性不可預(yù)知應(yīng)激。對照組每5只為1籠，不給予任何處理。應(yīng)激過程中，每周測量體質(zhì)量和進(jìn)行糖水偏好實(shí)驗(yàn)。應(yīng)激第4周，進(jìn)行糖水偏好實(shí)驗(yàn)、曠場試驗(yàn)和高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)。根據(jù)糖水偏好實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定CUS組成模大鼠為12只。行為學(xué)測試后，每組隨機(jī)選取6只大鼠進(jìn)行灌注，取出大腦制成等距連續(xù)切片，解剖學(xué)顯微鏡拍照后運(yùn)用體視學(xué)方法計算每只大

3、鼠大腦白質(zhì)的總體積。隨機(jī)抽取一側(cè)大腦半球，在大腦等距連續(xù)切片的白質(zhì)內(nèi)隨機(jī)取5個體積約1 mm3的白質(zhì)組織塊，運(yùn)用體視學(xué)與電鏡技術(shù)相結(jié)合的方法分別測量兩組大鼠大腦白質(zhì)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維總長度、總體積以及有髓神經(jīng)纖維髓鞘總體積等參數(shù)。
　　結(jié)果：經(jīng)過4周應(yīng)激后，與對照組比較，CUS組大鼠體質(zhì)量顯著降低（p＜0.05)，糖水偏好明顯下降（P＜0.05)。曠場實(shí)驗(yàn)中CUS組大鼠中央?yún)^(qū)域時間和中央時間比明顯降低（P＜0.05)，中央?yún)^(qū)域路程和中

4、央路程比明顯降低（P＜0.05)。但與對照組大鼠比較，CUS組大鼠高架十字迷宮參數(shù)均無明顯差異（P＞0.05)。CUS組大鼠大腦白質(zhì)總體積較對照組大鼠顯著性下降（P＜0.05)。CUS組大鼠大腦白質(zhì)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維總體積較對照組大鼠顯著性下降（P＜0.05)。CUS組大鼠大腦白質(zhì)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維軸突總體積均較對照組顯著性下降（p＜0.05)。CUS組大鼠大腦白質(zhì)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維總長度均較對照組大鼠顯著性下降（P＜0.05)。CUS組大鼠大腦白

5、質(zhì)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維平均直徑較對照組大鼠顯著下降（P＜0.05)。
　　結(jié)論： CUS模型大鼠表現(xiàn)出快感缺失、自發(fā)活動減少的抑郁樣行為，能夠用于抑郁癥的相關(guān)研究。CUS模型大鼠大腦白質(zhì)體積減少，白質(zhì)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維大量丟失，提示抑郁癥大腦白質(zhì)出現(xiàn)脫髓鞘改變，可能是抑郁癥發(fā)病的神經(jīng)結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)之一。
　　第二部分：氟西汀對CUS模型大鼠大腦白質(zhì)的作用
　　目的：以CUS模型大鼠為研究對象，觀察氟西汀抗抑郁治療過程中對大腦白質(zhì)及白質(zhì)

6、內(nèi)有髓神經(jīng)纖維及髓鞘的作用，進(jìn)一步探討抑郁癥的發(fā)病機(jī)制，尋找 SSRI對大腦白質(zhì)及白質(zhì)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維及髓鞘作用的可能機(jī)制。
　　方法：選取4-5周齡，體質(zhì)量120-160 g的雄性SD大鼠150只，每5只為1籠，適應(yīng)性喂養(yǎng)2周。2周后，進(jìn)行糖水訓(xùn)練。待糖水基線穩(wěn)定后，根據(jù)糖水偏好實(shí)驗(yàn)淘汰糖水偏好水平低于糖水基線的大鼠。將剩余的大鼠按成模率約30%配比，隨機(jī)分為對照組15只，CUS組113只。CUS組給予慢性應(yīng)激4周，對照組不給予任

7、何干預(yù)。每周測量體質(zhì)量和進(jìn)行糖水偏好實(shí)驗(yàn)，4周末根據(jù)糖水偏好實(shí)驗(yàn)結(jié)果篩選CUS組成模大鼠為30只，隨機(jī)分為CUS組15只和FLX+CUS組(FLX組)15只。納入后的CUS組和FLX組繼續(xù)按照應(yīng)激干預(yù)方案喂養(yǎng)，對照組正常喂養(yǎng)。第5周到第7周，F(xiàn)LX組給予5 mg/kg/d氟西汀腹腔注射，對照組和CUS組給予1 ml/kg/d生理鹽水腹腔注射, FLX組和CUS組繼續(xù)給予慢性應(yīng)激，每周測量體質(zhì)量和進(jìn)行糖水偏好實(shí)驗(yàn)。應(yīng)激第7周，進(jìn)行糖水偏好

8、實(shí)驗(yàn)、曠場試驗(yàn)和高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)。行為學(xué)測試后，每組隨機(jī)選取5只大鼠進(jìn)行麻醉、灌注，取出大腦制成等距連續(xù)切片，解剖學(xué)顯微鏡拍照后運(yùn)用體視學(xué)方法計算每只大鼠大腦白質(zhì)的體積。隨機(jī)抽取一側(cè)大腦半球，在大腦等距連續(xù)切片的白質(zhì)內(nèi)隨機(jī)取6個體積約1 mm3的白質(zhì)組織塊，運(yùn)用電鏡技術(shù)與體視學(xué)相結(jié)合的方法分別測量三組大鼠大腦白質(zhì)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維總長度和總體積以及有髓神經(jīng)纖維髓鞘總體積等參數(shù)。
　　結(jié)果：糖水偏好實(shí)驗(yàn)中，CUS組大鼠糖水偏好百分比明顯

9、低于對照組和氟西汀組（P＜0.05, P＜0.05)。曠場實(shí)驗(yàn)中，CUS組大鼠中央?yún)^(qū)域時間和中央時間比以及中央?yún)^(qū)域路程和中央路程比均顯著性低于對照組（P＜0.05, P＜0.05)，而與FLX組相比沒有顯著性差異（P＞0.05)。高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)中，CUS組中央?yún)^(qū)域時間及中央時間比、中央?yún)^(qū)域路程及中央路程比均顯著性低于對照組（P＜0.05)，而與FLX組相比沒有顯著性差異（P＞0.05)。體視學(xué)分析結(jié)果顯示，CUS組大鼠大腦白質(zhì)體積較對

10、照組顯著性減少21.14%（P＜0.05)，較FLX組減少12.54%，但差異無顯著性（P＞0.05)。CUS組大鼠大腦白質(zhì)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維總體積、總長度、髓鞘總體積、軸突總體積均較對照組顯著性下降（P＜0.05)，而與FLX組相比無顯著性差異（P＞0.05)。
　　結(jié)論：經(jīng)過7周應(yīng)激，CUS模型大鼠表現(xiàn)出快感缺失、自發(fā)活動減少、焦慮等行為，其大腦白質(zhì)體積及白質(zhì)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維和髓鞘大量丟失，提示抑郁癥大腦白質(zhì)脫髓鞘改變可能是抑郁癥發(fā)