豐富環(huán)境聯(lián)合氟西汀干預對大鼠抑郁樣行為、MBP及CNP的影響.pdf

1、背景：
　　抑郁癥已經(jīng)成為全球重要的的公共衛(wèi)生問題。研究表明抑郁癥患者大腦前額葉、胼胝體、海馬區(qū)等部位的腦白質的完整性明顯缺損。腦白質有大量的神經(jīng)纖維束組成，起著神經(jīng)信號的傳導作用。大量研究證實腦白質的損傷與抑郁癥的發(fā)生密切相關。豐富環(huán)境可以增加腦白質有髓神經(jīng)纖維總長度和總體積，還可以促進少突膠質細胞的增生，短期氟西汀治療能夠提高抑郁癥患者腦白質的完整性。本研究建立慢性不可預見性應激（chronic unpredictable s

2、tress，CUS）刺激制備抑郁模型大鼠，使用豐富環(huán)境及氟西汀為干預方式，以前額葉、胼胝體、海馬區(qū)為目標腦區(qū)，探討豐富環(huán)境聯(lián)合氟西汀干預對慢性應激所致抑郁大鼠行為學以及腦白質的影響。
　　目的：
　　1.探討豐富環(huán)境聯(lián)合氟西汀干預對慢性應激所致抑郁大鼠行為學的影響。
　　2.探討豐富環(huán)境聯(lián)合氟西汀干預對抑郁大鼠腦白質中髓鞘指標（髓鞘堿性蛋白）、以及少突膠質細胞標記物（2'-3'環(huán)核苷酸-3'-磷酸二酯酶）的影響。

3、>　　方法：
　　1.實驗動物分組以及抑郁模型的建立
　　SPF級雄性SD大鼠65只，采用曠場試驗對所有大鼠評估，不合格的剔除。按照隨機抽樣的方法分配10只大鼠為正常對照(A)組，標準環(huán)境飼養(yǎng)。使用CUS法對剩余大鼠進行抑郁模型的建立。造模后隨機抽樣40只抑郁大鼠，分配為抑郁模型(B)組、氟西汀(C)組、豐富環(huán)境(D)組、豐富環(huán)境+氟西汀(E)組。
　　2.氟西汀及豐富環(huán)境干預
　　對于C組大鼠，給予抗抑郁藥氟西

4、汀10 mg/kg.d灌胃;對于D組大鼠，給予豐富環(huán)境12 h/d干預;對于E組大鼠，給予抗抑郁藥氟西汀10 mg/kg.d灌胃，同時給予給予豐富環(huán)境12 h/d干預。
　　3.行為學評估
　　采用體質量的變化、蔗糖水消耗量實驗、曠場實驗三種方式分別在CUS刺激前、CUS刺激第21d，分別在氟西汀干預及豐富環(huán)境干預的第1周末、第2周末、第3周末評估大鼠的行為學變化。
　　4.MBP、CNP蛋白含量及mRNA表達測定的實

5、驗方法
　　使用免疫組化方法檢測大鼠海馬各區(qū)、前額葉區(qū)、胼胝體中MBP、CNP蛋白的含量;使用RT-PCR技術檢測大鼠海馬區(qū)、前額葉區(qū)MBP mRNA、CNP mRNA的表達量。
　　5.統(tǒng)計方法
　　實驗數(shù)據(jù)用SPSS20.0軟件包進行統(tǒng)計分析。多組計量資料采用單因素方差分析（one-way ANOVA）;兩兩比較時，方差齊時用LSD法檢驗，方差不齊時用非參數(shù)獨立樣本Kruskal-Wallis檢驗分析，兩組間均數(shù)比

6、較采用獨立樣本t檢驗，配對t檢驗。P＜0.05為差異有顯著性。
　　結果：
　　1.行為學評估結果
　　CUS刺激前，各組大鼠的體質量、曠場實驗、蔗糖水消耗量的測量相比差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。經(jīng)過21 d的CUS應激后;A組、C組、D組、E組大鼠與B組大鼠相比，在體質量變化、曠場實驗、蔗糖水消耗量的測量上差異均有顯著性(P＜0.05)。氟西汀及豐富環(huán)境干預第1周末，C組、D組、E組大鼠與B組大鼠相比部分行為明

7、顯改善，其中E組大鼠部分行為恢復較快;干預第2周末，E組大鼠與B組大鼠相比行為差異有顯著性(P＜0.05);干預第3周末;各組大鼠與B組大鼠相比行為差異均有顯著性(P＜0.05)，C組、D組、E組大鼠與A組大鼠相比行為差異均無顯著性(P＞0.05)，且這三組之間相比差異亦無顯著性(P＞0.05)。
　　2.大鼠海馬、前額葉、胼胝體區(qū)MBP、CNP蛋白的含量結果
　　在5組大鼠中，胼胝體區(qū)MBP、CNP蛋白的含量差異無顯著性(

8、P＞0.05)。在海馬CA1區(qū)、DG區(qū)以及前額葉區(qū)五組大鼠之間的MBP的含量差異有顯著性(F=6.956，P=0.000; F=6.098，P=0.001;F=6.590，P=0.000)，其中B組大鼠MBP的含量與其它各組相比明顯偏低，差異均有顯著性(P＜0.05)，且C組、D組、E組分別與A組相比差異均無顯著性(P＞0.05)。在海馬CA1區(qū)、DG區(qū)以及前額葉區(qū)CNP的含量差異有顯著性(F=7.277，P=0.000; F=4.93

9、7，P=0.002; F=7.431，P=0.000)。其中B組大鼠MBP的含量與其它各組相比明顯偏低，差異均有顯著性（P＜0.05），C組、D組、E組分別與A組相比差異均無顯著性(P＞0.05)，且這三組之間相比差異亦無顯著性(P＞0.05)。
　　3.大鼠海馬區(qū)、前額葉區(qū)MBP mRNA、CNP mRNA的表達量
　　在5組大鼠中，海馬區(qū)、前額葉區(qū)MBPmRNA的相對表達量差異有顯著性(F=2.872，P=0.044;

10、F=3.156，P=0.031)，其中B組大鼠與其它各組大鼠相比MBPmRNA的相對表達量均顯著降低(P＜0.05)，且C組、D組、E組分別與A組相比差異均無顯著性（P＞0.05）。海馬區(qū)、前額葉區(qū)CNPmRNA的相對表達量均存在著明顯的差異(F=4.283，P=0.009; F=2.829，P=0.046)，其中B組大鼠與其它各組相比CNPmRNA的相對表達量顯著降低，差異均有顯著性(P＜0.05)，C組、D組、E組大鼠分別與A組相比

11、差異均無顯著性（P＞0.05），且這三組之間相比差異亦無顯著性(P＞0.05)。
　　結論：
　　1.豐富環(huán)境和（或）氟西汀干預均可改善大鼠的抑郁樣行為，豐富環(huán)境聯(lián)合氟西汀在干預的早期表現(xiàn)出加快抑郁行為的改善。
　　2.CUS所致抑郁模型大鼠的海馬CA1、DG區(qū)及前額葉區(qū)MBP、CNP的蛋白含量及其轉錄水平均明顯降低，可能與抑郁癥的發(fā)病機制相關。
　　3.豐富環(huán)境和（或）氟西汀均可提高海馬CA1、DG區(qū)及前額葉區(qū)