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文檔簡介
1、目的:
甲狀腺乳頭狀癌(PTC)是甲狀腺癌中最常見的病理類型,而BRAFV600E突變和miRNAs表達失調均為PTC發(fā)生發(fā)展中重要的分子事件。本文將通過對PTC癌灶及相應正常甲狀腺組織中BRAF基因狀態(tài)及miRNAs的表達水平的檢測,分析兩類分子的表達情況及其與臨床病理特征的關系,并初步探討B(tài)RAF基因狀態(tài)與miR-146b、miR-221和miR-222表達水平的關系,最后對兩類分子應用于術前診斷進行評價,初步探討其臨床應
2、用價值。
方法:
所有標本于2013年5月至2013年8月在天津醫(yī)科大學腫瘤醫(yī)院手術室通過對離體組織粗針穿刺和開放活檢獲得,共收集有完整臨床病理資料的經(jīng)典型PTC組織標本49例及相應配對的正常甲狀腺組織17例,共66例標本。每份標本一部分應用聚合酶鏈式反應(PCR)技術進行BRAF基因狀態(tài)檢測,另一部分通過應用TaqMan(R)探針實時熒光定量聚合酶鏈反應(RT-PCR)方法檢測miR-146b、miR-221和mi
3、R-222的表達水平。采用SPSS19.0軟件將檢測結果和臨床資料進行統(tǒng)計學分析,并進行診斷試驗評價。以P<0.05作為差異有統(tǒng)計學意義。
結果:
1、BRAFV600E突變發(fā)生在PTC癌灶中,突變率為57.1%,未在正常甲狀腺組織發(fā)現(xiàn)其突變。相對于BRAF基因野生型,突變型的PTC的腺外侵犯和淋巴結轉移比例更高,分別占57.1%和53.6%,具有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。將淋巴結轉移進一步分為中央?yún)^(qū)淋巴結轉移組和
4、側頸轉移組后,兩者在突變型組均高于未突變型組,有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。而BRAFV600E突變在性別、年齡、術前TSH水平、Tg水平、尿碘值、BMI、腫瘤大小、雙側性、多灶性、TNM分期和伴發(fā)結節(jié)性甲狀腺腫或橋本氏甲狀腺炎等臨床病理特征上的差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
2、PTC患者癌灶中miR-146b、miR-221和miR-222的相對含量2-△CT均較正常甲狀腺組織表達水平明顯增高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0
5、.05)。相對正常甲狀腺組織,癌灶中三種miRNAs表達增高倍數(shù)2-△△CT的中位數(shù)分別為16.2、11.2和7.1。miR-146b表達在PTC患者臨床病理參數(shù)上無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。在侵出腺葉方面,侵出組PTC的miR-221和miR-222表達水平較未侵出組增高,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。而在淋巴結轉移方面和復發(fā)風險上僅miR-221表達表現(xiàn)出統(tǒng)計學差異。在其他臨床病理特征方面miR-221和miR-222的表達
6、水平均未見明顯差異。以BRAF基因狀態(tài)分組,28例突變型組miR-146b、miR-221和miR-222的相對含量2-△CT均較21例野生型組表達增高,差異有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。
3、BRAFV600E突變檢測診斷PTC的特異度(Sp)100%,陽性預測值(PPV)100%,但靈敏度(Se)57.1%,陰性預測值(NPV)為44.7%,整體準確度為75%。而miR-146b、miR-221和miR-222的表達能有較
7、好區(qū)別PTC和正常甲狀腺組織。miR-146b的Se為85.7%、Sp為100%、NPV為70.8%、PPV為100%和準確度為89.4%。miR-221的Se為89.8%、Sp為100%、NPV為77.3%、PPV為100%和準確度為92.4%。miR-222的Se為87.8%、Sp為100%、NPV為73.9%、PPV為100%和準確度為90.9%。
結論:
1、BRAFV600E突變發(fā)生在PTC病灶中。突變型P
8、TC腺外侵犯和淋巴結轉移比例更高,顯示出BRAFV600E突變可能與PTC腫瘤的高侵襲性相關。
2、PTC癌灶中miR-146b、miR-221和miR-222的表達水平明顯高于正常甲狀腺組織。miR-146b表達未發(fā)現(xiàn)與臨床病理特征相關;miR-221表達在是否侵出腺葉、有無淋巴結轉移(中央?yún)^(qū)和側頸)和復發(fā)風險上均具有統(tǒng)計學差異;miR-222僅在侵出腺葉和側頸淋巴結轉移組的表達高于相應陰性組。三種miRNAs在BRAF基因
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