B7-H4在胃癌細(xì)胞中表達(dá)及其表達(dá)下調(diào)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:通過(guò)檢測(cè)協(xié)同刺激因子B7-H4在胃癌組織中的表達(dá),并分析其與臨床病理特征的相關(guān)性,以及研究B7-H4表達(dá)下調(diào)對(duì)胃癌細(xì)胞增殖、遷移和凋亡的影響,以期探討B(tài)7-H4在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用及為探索胃癌治療新靶點(diǎn)建立理論基礎(chǔ)。
  方法:采用免疫組化技術(shù)檢測(cè)高通量組織芯片上胃癌組織中B7-H4表達(dá),并分析其表達(dá)與胃癌臨床病理特征的相關(guān)性;采用Western blot檢測(cè)胃癌細(xì)胞株SGC-7901、MGC-803、KATOⅢ、AGS中

2、B7-H4蛋白表達(dá),并選擇一株表達(dá)較高的胃癌細(xì)胞用于B7-H4基因干擾試驗(yàn);使用化學(xué)合成的B7-H4特異siRNA沉默胃癌細(xì)胞中B7-H4表達(dá);并采用CCK-8實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)、AnnexinⅤ/PI流式檢測(cè)凋亡實(shí)驗(yàn)及原位末端標(biāo)記(TUNEL)實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)細(xì)胞增殖、遷移和凋亡變化情況;采用Western blot檢測(cè)胃癌細(xì)胞中凋亡相關(guān)信號(hào)分子活化型caspase-3(cleaved caspase-3)、活化型caspase9(cle

3、aved caspase-9)、抑凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax的表達(dá)情況。
  結(jié)果:B7-H4在胃癌組織中高表達(dá)率為41.8%(130/311),其表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和TNM分期明顯相關(guān),淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和未轉(zhuǎn)移組B7-H4高表達(dá)率分別為51.2%和35.3%(p=0.005),Ⅰ~Ⅱ期組和Ⅲ~Ⅳ期組B7-H4高表達(dá)率分別為34.4%和52.3%(p=0.002),而與性別、年齡、病理分級(jí)、侵襲程度無(wú)關(guān)(p>0.05)。B7-

4、H4蛋白在胃癌細(xì)胞株KATOⅢ、AGS和MGC-803中呈高表達(dá),而在胃癌細(xì)胞株SGC-7901中低表達(dá)或幾乎不表達(dá);下調(diào)B7-H4在MGC-803細(xì)胞中表達(dá)可抑制MGC-803細(xì)胞增殖和遷移能力(p<0.05),并且可促進(jìn)MGC-803細(xì)胞凋亡(p<0.05)。此外,B7-H4表達(dá)下調(diào)可激活MGC-803細(xì)胞中caspase-3和caspase-9,增加了Bax/Bcl-2蛋白比值。
  結(jié)論:B7-H4在胃癌組織中呈高表達(dá),并

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