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1、椰子胚培養(yǎng)技術(shù)在種質(zhì)資源收集、保存和交換方面具有重要意義。本研究以海南高種、馬哇、黃矮、紅矮等幾個(gè)椰子品種的成熟胚為試材,主要研究了外植體的消毒處理、基本培養(yǎng)基篩選、不同品種(品系)間差異、活性炭濃度、蔗糖濃度、胚萌發(fā)和胚苗生長(zhǎng)各階段的培養(yǎng)條件以及胚培苗的煉苗移栽。建立了穩(wěn)定的胚培養(yǎng)技術(shù)體系,在國(guó)內(nèi)首次成功獲得胚培養(yǎng)苗并移栽成活。主要研究結(jié)果如下: 1、胚消毒方法:用75%酒精浸泡30s,無(wú)菌水洗1-2次,之后用0.15%的Hg
2、Cl2溶液浸泡20min,用無(wú)菌水洗3-5次,置于無(wú)菌培養(yǎng)皿中剝?nèi)∠屡撸儆?.03%的HgCl2溶液對(duì)胚進(jìn)行表面消毒10min,無(wú)菌水洗5次。接種時(shí),用無(wú)菌濾紙吸干胚表面水分,可以有效地減少污染率和褐化率,迅速有效地建立胚的無(wú)菌培養(yǎng)體系。 2、Y3培養(yǎng)基為各椰子品種胚離體培養(yǎng)的基本培養(yǎng)基,不同椰子品種胚的萌發(fā)率及胚苗生長(zhǎng)狀態(tài)存在較大差異,其中海南高種的胚苗生長(zhǎng)較好,萌發(fā)率最高,其次是馬哇、黃矮和紅矮品種。 3、暗培養(yǎng)較
3、光照培養(yǎng)更有利于胚的萌發(fā);胚的萌發(fā)培養(yǎng)以不添加任何激素的Y3基本培養(yǎng)基萌發(fā)率最高。附加濃度為0.2-0.3%的活性炭,可有效防止胚的褐化,并對(duì)根有很好的促進(jìn)作用。 4、生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素對(duì)胚苗的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用,胚苗生長(zhǎng)適宜培養(yǎng)基為Y3+BA2mg/L+NAA1mg/L+IBA5mg/L+AC0.25%+蔗糖6%+瓊脂0.45%;切斷初生根有利于次根的發(fā)育,修剪次生根有利于三級(jí)根的發(fā)育。 5、椰子胚培苗移栽成活的關(guān)鍵在于胚
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