普萘洛爾對(duì)嬰幼兒血管瘤裸鼠模型中NF-κB等因子表達(dá)影響的研究.pdf

1、 目的：研究核轉(zhuǎn)錄因子-kappa B(nuclear transcription factor-kappa B,NF-κB),kappa B抑制因子(inhibitory factor kappa B,IκB)和抗凋亡基因B細(xì)胞淋巴瘤因子-2(B-cell Lymphoma-2,Bcl-2)在普萘洛爾干預(yù)嬰幼兒血管瘤裸鼠模型中的表達(dá)情況,探討NF-κB等因子在普萘洛爾治療中的可能作用。方法：無菌手術(shù)切除4月大的增殖期嬰幼兒血管瘤,采

2、用組織塊移植法,將新鮮瘤體分成3mm×4mm×5mm大小的組織塊,移植于無特定病原體 (specific pathogen free,SPF)級(jí)裸鼠的雙側(cè)后肢皮下,每只兩處,建立嬰幼兒血管瘤的裸鼠移植模型。在移植后的第45天,將移植瘤組織存活的50只實(shí)驗(yàn)裸鼠進(jìn)行隨機(jī)分為2組,普萘洛爾干預(yù)組(灌注普萘洛爾溶液)和生理鹽水對(duì)照組(灌注生理鹽水)每組25只,進(jìn)行干預(yù),觀察移植瘤的生長(zhǎng)變化情況；分別在干預(yù)前和干預(yù)后第7d、14d、21d、28d

3、,用頸椎脫臼法隨機(jī)處死兩組各5只裸鼠,一次10只,切取血管瘤組織,觀察瘤體大小、顏色、質(zhì)地,用游標(biāo)卡尺測(cè)量瘤體的最大直徑a和橫徑b,根據(jù)公式V=π/6×a×b2估算移植瘤體積,分別進(jìn)行病理切片HE染色、免疫組化檢測(cè)及組織RT-PCR分析。其中,免疫組化檢測(cè)移植瘤組織中NF-κBp65、IκB-α、Bcl-2的表達(dá)情況；半定量RT-PCR檢測(cè)NF-κBp65 mRNA的表達(dá)情況。結(jié)果：1.大體標(biāo)本和HE染色：普萘洛爾組瘤體較干預(yù)前逐漸縮小

4、(P<0.05),色澤變淡,質(zhì)地變硬；HE染色光鏡下表現(xiàn)為血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞明顯減少,并有大量的纖維脂肪組織。生理鹽水組瘤體第7d、14d較干預(yù)前增大(P<0.05),血供良好,色澤紅潤(rùn),有彈性, HE染色光鏡下表現(xiàn)為大量的血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞和微細(xì)血管；第21d、28d較干預(yù)前縮小,色澤變淡,質(zhì)地變硬,光鏡下表現(xiàn)為瘤體細(xì)胞減少,伴有大量的纖維組織。在干預(yù)后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)上,兩組瘤體體積比較具有明顯差異(P<0.05)。2.免疫組化：在干預(yù)后各個(gè)時(shí)間

5、點(diǎn)上,普萘洛爾組中NF-κBp65的表達(dá)低于生理鹽水組,普萘洛爾組中IκB-α的表達(dá)高于生理鹽水組,普萘洛爾組中Bcl-2的表達(dá)低于生理鹽水組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；普萘洛爾組中NF-κBp65與Bcl-2兩者之間存在直線正相關(guān)關(guān)系(r=0.901,P<0.01)。3.半定量RT-PCR：在干預(yù)后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)上,普萘洛爾組瘤體NF-κBp65 mRNA的相對(duì)表達(dá)低于生理鹽水組(P<0.05)。結(jié)論：1.普萘洛爾可促進(jìn)嬰幼兒血