普萘洛爾治療難治性嬰幼兒血管瘤的臨床療效觀察及機制研究.pdf

1、第一部分普萘洛爾治療難治性嬰幼兒血管瘤的臨床觀察
　　 目的:觀察普萘洛爾治療難治性嬰幼兒血管瘤的臨床療效及安全性。
　　 方法:給68例通過臨床和輔助檢查診斷的難治性嬰幼兒血管瘤患兒給予普萘洛爾，1.0～2.0mg/kg/d，分2～3次口服，每月復(fù)診1次觀察和記錄血管瘤大小、質(zhì)地、顏色的變化等，并隨時處理治療過程中出現(xiàn)的不良反應(yīng)。按4級評分法對近期療效進行評價。
　　 結(jié)果:68例隨訪3～13個月，療效：Ⅰ級8

2、例，Ⅱ級：13例，Ⅲ級：29例，Ⅳ級：13例。68例均未發(fā)生嚴重不良反應(yīng)，但均未有1例完全消褪。
　　 結(jié)論;
　　 1.小劑量普萘洛爾(1～2mg/kg/d)治療難治性嬰幼兒血管瘤療效確切，不良反應(yīng)輕微，可作為難治性嬰幼兒血管瘤的首選治療藥物，治療的劑量及療程宜個體化，服藥、停藥時宜逐增、逐減。
　　 2.嬰幼兒難治性血管瘤經(jīng)口服普萘洛爾治療后皮損不能完全消退，局部可出現(xiàn)疤痕、色脫等，所以診斷一旦明確，宜盡早治

3、療，必要時可結(jié)合局部治療去除殘余病變組織。
　　 目的:通過研究普萘洛爾對HUVEC-12細胞(Human UmbilicalVein Endothelial cells)分泌VEGF(Vascular Endothelial GrowthFactor)的影響以及相關(guān)的信號通路，進一步探討普萘洛爾治療難治性血管瘤的分子生物學(xué)機制。
　　 方法:以離體培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC-12)為模型，用濃度分別為16ug/

4、ml、8ug/ml、4ug/ml、2ug/ml、1ug/ml、0ug/ml(空白對照)的普萘洛爾干預(yù)，采用ELISA法檢測各組細胞培養(yǎng)上清液(cultural supernatants，CS)中 VEGF的濃度。用MTT法檢測VEGF促進血管內(nèi)皮細胞增殖的最佳濃度，建立陽性系統(tǒng)，在此基礎(chǔ)上用Western印跡法檢測不同濃度普萘洛爾干預(yù)后p-JNK(磷酸化的JNK)和p-P38(磷酸化的P38)的表達.
　　 結(jié)果:
　　

5、 1.不同濃度普萘洛爾組的細胞毒作用
　　 在細胞毒實驗中HUVEC-12細胞在接受不同濃度的普萘洛爾干預(yù)后，MTT檢測結(jié)果顯示實驗組與空白對照組比較，不同濃度的普萘洛爾對人血管內(nèi)皮細胞細胞毒作用均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)
　　 2.不同濃度普萘洛爾組CS中VEGF的濃度普萘洛爾干預(yù)組CS中VEGF的濃度在16ug/ml，8ug/ml，4ug/ml，2ug/ml，1ug/ml與空白對照組相比均下降(P<0.05)，有

6、顯著統(tǒng)計學(xué)差異，在普萘洛爾濃度為8ug/ml時下降最明顯。
　　 3.不同濃度的VEGF對人血管內(nèi)皮細胞的增殖影響
　　 在細胞增殖實驗中HUVEC-12細胞在接受為40ng/ml，20ng/ml，10ng/ml，5ng/ml，2.5ng/ml的VEGF干預(yù)48h后，與空白對照組相比，VEGF對人血管內(nèi)皮細胞有促進增殖的作用，當濃度為20ng/ml時最為明顯(P<0.001)。
　　 4.普萘洛爾干預(yù)組中p-JN

7、K和p-P38的表達：
　　 p-JNK和p-P38信號均先增強后減弱，P-Jnk在普萘洛爾濃度為1ug/ml表達最明顯，而P-P38在普萘洛爾濃度為4ug/ml時表達最明顯，在普萘洛爾濃度為16ug/ml時兩者都有下降。
　　 結(jié)論：
　　 1.普萘洛爾對靜脈內(nèi)皮細胞分泌VEGF有抑制作用，在濃度為8 ug/ml時對靜脈內(nèi)皮細胞分泌VEGF的抑制作用最明顯。
　　 2.P38、JNK激酶在普萘洛爾影響H