EPO對(duì)大鼠肝硬化引起心肌損傷的干預(yù)作用.pdf

1、目的:觀察EPO干預(yù)對(duì)大鼠肝硬化引起心肌損傷的影響,并分析心肌TGF-β1在其中的作用。采用CCL4復(fù)合因素法建立肝硬化大鼠模型,觀察心功能變化及心肌纖維化的發(fā)生,測(cè)定心肌TGF-β1的改變,初步探討EPO對(duì)肝硬化誘導(dǎo)心肌損傷的作用機(jī)制,為臨床改善和預(yù)防肝硬化心肌病的并發(fā)癥提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:雄性SD大鼠36只,隨機(jī)分為3組,(1)正常對(duì)照組(normal組,n=10),腹部皮下注射等量的生理鹽水,給予正常飼料和自來(lái)水

2、。(2)肝硬化模型組(livercirrhosis,LC組,n=13),采用CCl4復(fù)合因素建立肝硬化大鼠模型:肝硬化組第一天腹部皮下注射0.5ml/100gCCl4原溶液,以后每周2次注射40％CCl4油溶液0.3ml/100g,單純玉米面(前2周為20%豬油混入)混入0.5%膽固醇,30%酒精為其唯一飲料,共8周建立肝硬化模型。(3)肝硬化+促紅細(xì)胞生成素干預(yù)組(LC+EPO干預(yù)組,n=13),模型建立方法同LC組,建模第5周時(shí)腹腔

3、注射重組人促紅細(xì)胞生成素(rhEPO)2000IU/kg,每周2次,共4周至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。造模結(jié)束大鼠給予4%水合氯醛1ml/100g麻醉后氣管插管,左心室插管觀察左心室峰壓(leftventricularsystolicpressure,LVSP),左心室內(nèi)壓最大上升和下降速率(maximalrise/fallrateofleftventricularpressure,±dp/dtmax)等指標(biāo);測(cè)血清中乳酸脫氫酶(lactatedehy

4、drogenase,LDH),肌酸激酶同工酶(creatinekinaseisoenzyme,CK-MB)水平;ELISA法測(cè)血清IL-6水平;部分心肌組織標(biāo)本多聚甲醛固定,石蠟包埋切片進(jìn)行HE染色及Masson染色觀察組織結(jié)構(gòu)改變和膠原生成改變;逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reversetranscriptionpolymerasechainreaction,RT-PCR)檢測(cè)各組心肌組織中TGF-β1,ColⅠmRNA基因表達(dá)的變化。

5、>　　結(jié)果:
　　(1)心體比:與normal組相比,LC組和LC+EPO干預(yù)組心體比明顯增高(p<0.01);與LC組相比,LC+EPO干預(yù)組心體比顯著降低(p<0.01);
　　(2)心室動(dòng)力學(xué)改變:與normal組相比,LC組左心室收縮峰壓,左心室內(nèi)壓最大上升和下降速率下降明顯(p<0.01);與LC組相比,LC+EPO干預(yù)組明顯促進(jìn)了左心室收縮峰壓、左心室內(nèi)壓最大上升和下降速率的恢復(fù)(p<0.05);
　　(3

6、)血清LDH、CK-MB含量:與normal組相比,LC組LDH、CK-MB含量顯著增高(p<0.01),與LC組相比,EPO干預(yù)后血清LDH、CK-MB含量明顯降低(p<0.05),但高于normal組(p<0.05);
　　(4)血清IL-6水平改變:與normal組相比,LC組IL-6水平顯著增高(p<0.01),與LC組相比,LC+EPO干預(yù)組血清IL-6水平含量顯著降低(p<0.01);
　　(5)組織病理學(xué)改變:

7、HE及Masson染色結(jié)果顯示,normal組肌纖維結(jié)構(gòu)正常,少有間質(zhì)細(xì)胞增多,LC組肌纖維走向紊亂無(wú)序,肌絲斷裂、萎縮,有膠原沉積現(xiàn)象,LC+EPO組有明顯改善;
　　(6)RT-PCR檢測(cè)心肌組織中TGF-β1mRNA、ColⅠmRNA變化:與normal組相比,LC組心肌組織TGF-β1mRNA水平上調(diào)(p<0.01),ColⅠmRNA水平上調(diào)(p<0.01),與LC組相比,LC+EPO組TGF-β1mRNA水平下調(diào)(p<0