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文檔簡介
1、本文主要從以下幾部分展開: 第一部分: 目的:篩選復(fù)方心腦腎康的最佳組方并建立質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法:采用體外心肌組織抗氧化損傷的正交設(shè)計法,以各組分對MDA抑制率為檢測指標(biāo),將茶多酚、銀杏葉提取物、三七總皂苷、丹參四種活性提取成分有機組方制成復(fù)方心腦腎康(XNSK);應(yīng)用薄層色譜方法(TLC)對TP、Egb761、PNS、DS進行了定性鑒別;應(yīng)用高效液相色譜方法(HPLC)測定XNSK中EGCG含量,并且通過結(jié)果制定膠囊中EG
2、CG的最低標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果:初步篩選出對心肌缺血起保護作用的XNSK最佳組方;在薄層色譜中,四個組分分別以不同展開劑展開后均呈單一斑點,其Rf值分別為0.43、0.59、0.61、0.45;在高效液相色譜中,以外標(biāo)法計算XNSK中EGCG含量,得制劑中EGCG含量應(yīng)不低于197.76mg/g,通過實驗結(jié)果建立了XNSK的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)論:本課題組初步篩選出XNSK的最佳組方;XNSK中EGCG的含量不低于197.76mg/g即可達(dá)到該制劑的質(zhì)量
3、標(biāo)準(zhǔn),表明分析方法合理、可行,復(fù)方的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可以控制。 第二部分: 目的:探討復(fù)方心腦腎康防治急性心肌缺血再灌注損傷的干預(yù)作用和可能機制。方法:利用Wistar大鼠結(jié)扎冠狀動脈左前降支30min后放松60min復(fù)制缺血再灌注損傷模型,同時采用心內(nèi)插管技術(shù)檢測大鼠心臟血流動力學(xué);通過測定多項生化指標(biāo)來探討藥物抗損傷的可能機制;測定AST、LDH、LDH-1、CK、CK-MB的含量了解XNSK對心肌酶學(xué)的影響;測定各組ADP
4、誘導(dǎo)的血小板聚集抑制率了解其對微循環(huán)的影響機制;病理切片觀察心肌組織形態(tài)學(xué)的改變及電鏡下觀察了心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化;并觀察了凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2和Bax表達(dá)的情況。結(jié)果:與模型組相比較,XNSK能使心率(HR)、左心室收縮壓(LVSP)、左室內(nèi)壓最大上升速率(+dp/dtmax)、左室內(nèi)壓最大下降速率(-dp/dtmax)升高,降低左心室終末舒張壓(LVEDP),并有一定的劑量依賴關(guān)系;SOD活力和ATP酶含量明顯高于模型組(P<0
5、.05),而MDA、ROS、NOS含量明顯低于模型組(P<0.05),均呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系;能降低ADP誘導(dǎo)的血小板聚集抑制率;觀察發(fā)現(xiàn)XNSK使缺血再灌注心肌細(xì)胞的組織形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)受損傷程度減輕;心肌Bax蛋白表達(dá)明顯減少(P<0.05),對Bcl-2蛋白表達(dá)明顯增加(P<0.01),并能顯著降低Bax/Bcl-2的比值(P<0.05)。結(jié)論:心腦腎康對急性心肌缺血再灌注損傷具有防治作用,其作用機制可能與抗脂質(zhì)過氧化物損傷、抑制血小
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