靈芝菌種的選育及液體發(fā)酵飲料的研究.pdf

1、靈芝(Ganoderma Lucidum)為擔(dān)子菌綱多孔菌科靈芝屬真菌，它在防病治病，延年益壽等方面的作用得到中外學(xué)者的公認(rèn)。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，靈芝的功效成分靈芝多糖具有很高的營養(yǎng)價值和保健價值<'[2]>。 本論文以靈芝多糖的產(chǎn)量為目標(biāo)，采用靈芝深層發(fā)酵工藝，制備靈芝發(fā)酵液，經(jīng)過合理調(diào)配，應(yīng)用正交試驗設(shè)計，結(jié)合感官分析，研制出一種既保持靈芝原有營養(yǎng)價值和保健功能，又具有獨特風(fēng)味和口感的復(fù)合型飲料。為人們提供了一種集營養(yǎng)與良好

2、口感于一身的飲料，有著廣闊的前景。 本論文運用分子生物學(xué)的方法對四株生產(chǎn)用菌進(jìn)行鑒定，四株菌均屬于靈芝屬，說明分子生物學(xué)方法是鑒定靈芝的快速、有效的方法，可用于微生物的系統(tǒng)發(fā)育研究，可以鑒定到屬，而菌株間的差異不能顯示出來。 本文的主要內(nèi)容包括以靈芝多糖及感官評定為指標(biāo)，確定了最佳培養(yǎng)條件和營養(yǎng)條件，即以玉米2％、蛋白胨0.2％、KH<,2>PO<,4> 0.3％、KCl 0.05％、MgSO<,4> 7H<,2>O 0

3、.15％為搖瓶發(fā)酵液體培養(yǎng)基；最適培養(yǎng)條件為：溫度25℃、初始pHS.5、搖床轉(zhuǎn)速150rpm、種齡144h、裝液量150m1/250ml。在此條件下?lián)u瓶發(fā)酵培養(yǎng)6天，菌絲體產(chǎn)量達(dá)3.26mg/ml(干重)，多糖含量達(dá)3.21％。 本文通過對靈芝多糖含量的測定及感官評定，選育出發(fā)酵液澄清、口味略苦、多糖含量高的薄樹芝LWG4作為液體深層擴大培養(yǎng)的菌株。 本文以靈芝深層發(fā)酵培養(yǎng)的新鮮菌絲體為原料，分別對熱水浸提和超聲波破

4、碎兩種方法進(jìn)行研究，確定最佳提取條件：沸水浸提2～3小時；超聲波破碎40分鐘。此時多糖釋放完全，且多糖結(jié)構(gòu)破壞不大。 本文使用DEAE-52纖維素陰離子交換柱分離純化靈芝菌絲體多糖，得到中性多糖A、酸性多糖B、酸性多糖C、酸性多糖D、酸性多糖E五種多糖。經(jīng)過紫外.可見掃描儀在200～400mm掃描，260nm、280nm處無吸收峰，說明是純多糖；以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)糖進(jìn)行薄層層析，發(fā)現(xiàn)酸性多糖E是同多糖，即葡聚糖。 本文將選育

5、出的優(yōu)秀菌株LWG4上發(fā)酵罐做深層發(fā)酵擴大培養(yǎng)，觀察其發(fā)酵液及菌絲球形態(tài)，并測定多糖含量，結(jié)果為在發(fā)酵的第6天，菌體的生物量的累積達(dá)到高峰，獲得的菌體干重達(dá)2.511mg/ml，多糖含量為1.762％，雖然菌絲體干重和多糖含量都沒有搖瓶培養(yǎng)時高，工藝參數(shù)有待于進(jìn)一步改進(jìn)，但是為靈芝深層發(fā)酵的擴大培養(yǎng)提供了數(shù)據(jù)，有一定的經(jīng)濟價值。 本文也做了靈芝飲料的感官評定：通過查閱文獻(xiàn)，設(shè)計了以蔗糖、檸檬酸、香精種類、香精量為4因素的10個正