卑霉素產(chǎn)生菌的菌種選育和發(fā)酵工藝研究.pdf

1、卑霉素為正糖霉素族的寡糖類抗生素，是一種新型消化促進(jìn)劑，以其高效、低毒和低殘留在畜牧業(yè)上有著廣闊的應(yīng)用前景。本文研究的主要目的是通過(guò)對(duì)卑霉素產(chǎn)生菌綠色產(chǎn)色鏈霉菌(AS4.126)菌種選育和發(fā)酵工藝優(yōu)化，得到幾株高產(chǎn)菌株，以不斷提高卑霉素產(chǎn)量，為實(shí)現(xiàn)我國(guó)飼料工業(yè)的高效、優(yōu)質(zhì)和低耗做出積極的探索。 根據(jù)卑霉素的生物合成途徑和代謝調(diào)控原理，運(yùn)用紫外線、微波和亞硝酸等多種誘變因子進(jìn)行菌種誘變，并結(jié)合理化選育和自然篩選，篩選得到抗自身產(chǎn)物

2、的突變株。經(jīng)過(guò)誘變篩選，選育出了卑霉素高產(chǎn)菌株TN-29，發(fā)酵單位為65u/mL，比出發(fā)菌株綠色產(chǎn)色鏈霉菌提高了2.7倍。對(duì)菌株TN-29進(jìn)行了遺傳穩(wěn)定性試驗(yàn)，經(jīng)過(guò)5次傳代后，結(jié)果表明，該菌株具有良好的遺傳穩(wěn)定性。 利用正交實(shí)驗(yàn)方法優(yōu)化液體種子培養(yǎng)基的配方，通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)研究了孢子接種齡和接種量對(duì)種子生長(zhǎng)的影響。優(yōu)化的液體種子培養(yǎng)條件是：1)培養(yǎng)基配方：蛋白胨：2％，豆餅粉3.2％，甘露醇1.4％，葡萄糖0.5％，硫酸銨0.64

3、％，MgSO40.005％,NaCl0.5％；2)孢子齡84h,接種量為1.95億個(gè)/50mL，種子液DNA含量最高，最大值可達(dá)0.693g/ml。 分別利用全因子試驗(yàn)、最陡爬坡試驗(yàn)和響應(yīng)面法優(yōu)化TN-29發(fā)酵培養(yǎng)基配方，并通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)研究了孢子接種齡和接種量對(duì)卑霉素產(chǎn)量的影響。優(yōu)化的發(fā)酵培養(yǎng)基配方為：豆餅粉為3.61％，甘露醇為2.99％，葡萄糖為0.58％，可溶性淀粉0.64％，硫酸銨0.25％，硫酸鎂0.005％，CaC