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1、首都師范大學(xué)碩士學(xué)位論文副豬嗜血桿菌aroA基因鑒定分析及其轉(zhuǎn)移載體的構(gòu)建研究姓名:薛曉晶申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師:王金洛徐福洲20080407AbstractHaemophilusparasuisanon—motile,small,pleomorphicrodinthefamilyPasteurellaceae,isacommensalorganismoftheupperrespiratorytractofconve
2、ntionalpigsUndersomeconditions,itcancauseseveresystemicdiseasesIthasrecentlyemergedasoneofthemajorcaBrsesofnurserymortalityinswineherdsinthewholeworldFactorsinvolvedinsystemicinvasionby爿=parasu括remainlargelyunknownThearo
3、Agene,encoding5enolpyruvylshikimate一3phosphatesynthetasewhichisakeyenzymeinthebiosynthesisofaromaticaminoacids,hasbeenusedsuccessfullyfortaxonomicpurposesandinactivatedavirulentmutantInthispaperthisisthefirstreportshowin
4、ganapproximately37kbfragmentcontainingthewholearoAgenewasobtainedfromthegenomicDNAofallserovarsofHaemophilusparasuisbyPCRandbacterialgenomewalkingtechniquesBLASTandDNAStaranalysisshowedthatthesizeofthewholearoAgeneWas131
5、4bpThenucleotidesequencesimilarityWasabove977%inHparasu括serovarsAndthesimilarityWas706%789%between15serovarsof且parasuisandothermembersofPasteurellaceaeTheresultSconfirmedthatthenucleotidesequenceofthearoAgeneofallserovar
6、sofHparasu婦Waswellconserved,aswellasinGramnegativeorganismsBasedontheresearchofobtainingthearoAgeneofHparasuisinvestigationtherelationbetweenthearoAgeneandHparasuischaracterssuchasthediversityoftheserovarsandthetoxicityI
7、dentificationandanalysisonthearoAgenewillbehelpfulforresearchingthefunctionofaroAwithinHparasuisandfurtherinvestigatingHparasuischaractersA3640bpfragmentcontainingthearoAgenewasamplifiedfromHpsserovar5genomicDNAbyPCRBase
8、doncloningandsequencing,theHindllIsiteofthearoAgenewasinsertedwithachloramphenicolresistancegenecassetteandthetransferplasmidpTA—Chl。wasconstructedKeywords:Haemophilusparasuis,aroAgene,genomewalkingtechniques,transferpla
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