Twist1及Twist1-AS在骨肉瘤組織及細胞中的表達及相關性研究.pdf

1、目的:
　　Twist1是一類轉錄因子，Twist1-AS屬于lncRNA，兩者可通過互補配對形成雙鏈RNA(dsRNA)，這兩者在多個腫瘤病理過程中起到了調控作用，然而在骨肉瘤發(fā)病過程中的作用尚不明確，本文主要通過測定Twist1及Twist1-AS分別在骨肉瘤細胞系，骨肉瘤組織，瘤旁組織及正常組織中的表達情況，試評估兩者在骨肉瘤發(fā)病過程中的相關性并為后續(xù)研究其機制提供理論依據。
　　方法:
　　1.應用RT-PCR

2、檢測7名骨肉瘤患者標本（含骨肉瘤瘤體組織，瘤旁組織及正常切緣組織）中Twist1及Twist1-AS的表達情況，采用SPSS19.0對結果進行統(tǒng)計學分析，探討兩個基因在瘤體組織，瘤旁組織與正常組織之間的表達差異。
　　2.應用RT-PCR檢測骨肉瘤細胞系MG-63，U2-OS及人成骨細胞hFOB1.19中Twist1及Twist1-AS的表達情況，采用SPSS19.0對結果進行統(tǒng)計學分析，研究兩者在骨肉瘤中的表達差異。
　　

3、結果:
　　1.Twist1在7例骨肉瘤瘤體組織中表達量高于正常切緣組織(P＜0.05)，7例瘤旁組織（距離瘤體2cm的組織）中Twist1的表達水平與正常切緣組織的差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，7例瘤旁組織（距離瘤體2cm的組織）中Twist1的表達水平與腫瘤組織的差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)
　　2.Twist1-AS在7例骨肉瘤瘤體組織中表達量高于正常切緣組織(P＜0.05)，7例瘤旁組織（距離瘤體2cm的組織

4、）中Twist1-AS的表達水平與正常切緣組織的差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，7例瘤旁組織（距離瘤體2cm的組織）中Twist1-AS的表達水平與腫瘤組織的差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　3.MG-63和U2-OS中Twist1的表達量與hFOB1.19的差異無明顯統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　4.MG-63和U2-OS中Twist1-AS的表達量較hFOB1.19高(P＜0.05)。
　　5.使用隨機

5、引物進行Twist1-AS逆轉錄將導致RT-PCR無法得到Ct值。
　　結論:
　　1.本實驗明確了Twist1/Twist1-AS這對基因在骨肉瘤組織中表達水平較正常組織有所升高，驗證了本課題組前期研究基因芯片結果，并為后續(xù)探索其作用機制提供了理論依據和基因儲備。
　　2.Twist1-AS在腫瘤細胞中的表達量顯著高于hFOB1.19。
　　3.通過RT-PCR進行檢測AS這類反義轉錄物時，必須進行特異性逆轉錄