廣東客家人G6PD基因位點(diǎn)優(yōu)勢(shì)選擇的研究.pdf

1、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(Glucose-6-phosphate dehydrogenase，G6PD，EC1.1.1.49；MIM＃305900)是磷酸戊糖途徑的關(guān)鍵酶，其編碼基因?yàn)閄連鎖的看家基因，位于Xq28，由13個(gè)外顯子和12個(gè)內(nèi)含子組成，全長(zhǎng)20114bp。其主要功能為產(chǎn)生NADPH。G6PD具有顯著的遺傳多樣性，研究顯示不同種族人群G6PD基因突變類型和發(fā)生頻率不同。中國(guó)人群主要以G6PDKaiping，c.1388G＞A、

2、G6PDCanton，c.1376G＞T、G6PDGaohe，c.95A＞G為主。G6PD缺乏癥是一組常見的人類酶缺陷病，全球范圍內(nèi)約有四億人受累?；颊呙富钚宰儺惙秶艽??？梢鹦律鷥狐S疸、急性溶血和重癥慢性非球型細(xì)胞溶血性貧血等。高發(fā)地區(qū)為非洲、地中海部分地區(qū)、東南亞和拉丁美洲。
　　 瘧疾被認(rèn)為是已知的近期人類基因組受到的最強(qiáng)的進(jìn)化選擇因素之一。G6PD在保護(hù)紅細(xì)胞免受氧化性應(yīng)激上發(fā)揮著重要作用。群體中G6PD缺乏癥等位基因

3、的高頻率是對(duì)抗瘧疾的保護(hù)作用。關(guān)于非洲G6PDA-基因位點(diǎn)的進(jìn)化研究也顯示出了局部和近期的優(yōu)勢(shì)選擇作用，這一過程可能起始于距今2500-3800年。這些都與非洲瘧疾的流行病學(xué)調(diào)查是吻合的。
　　 客家是一個(gè)具有顯著特征的漢族分支族群，也是漢族在世界上分布范圍廣闊、影響深遠(yuǎn)的民系之一。從西晉永嘉之亂開始，中原漢族居民大舉南遷，抵達(dá)粵贛閩等地，與當(dāng)?shù)赝林用耠s處，互通婚姻，經(jīng)過千年演化最終形成相對(duì)穩(wěn)定的客家民系。關(guān)于客家淵源的看法主

4、要有兩種：(1)純粹由北方南遷漢人發(fā)展演變而來；(2)北方南遷漢人融合南方土著發(fā)展演變而來。更早的史料記載的關(guān)于秦朝軍事活動(dòng)相關(guān)的移民也有可能是更早的南遷漢民。這些移民加速了民族融合和這一地區(qū)經(jīng)濟(jì)文化的發(fā)展。本課題組使用X染色體LDBlock分析的方法，尋找G6PD等位基因受到優(yōu)勢(shì)選擇的證據(jù)，并為追溯客家人的起源和遷徙歷史提供遺傳學(xué)證據(jù)。
　　 本研究應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction，PCR)

5、，變性高效液相色譜(denaturing high performance liquid chromatography，DHPLC)和DNA測(cè)序技術(shù)等方法對(duì)104例廣東客家男性進(jìn)行了G6PD基因分型，共發(fā)現(xiàn)10種SNPs，其中有9種在數(shù)據(jù)庫中已報(bào)道，在第5內(nèi)含子發(fā)現(xiàn)的g.14359C＞A為首報(bào)SNP。
　　 在本課題組以往研究的基礎(chǔ)上，本研究擴(kuò)大樣本量，分析比較廣東客家G6PD缺陷男性患者和廣東客家G6PD正常男性對(duì)照的G6PD

6、和L1CAM的SNPs分布、LDBlock和單體型結(jié)構(gòu)。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)客家G6PD缺乏癥男性患者在G6PD基因和L1CAM基因之間形成了一個(gè)由12個(gè)SNPs構(gòu)成的、長(zhǎng)639kb的LDBlock，顯示出長(zhǎng)的LD，其中中國(guó)人常見的G6PDKaipingc.1388G＞A、G6PDCantonc.1376G＞T、G6PDGaohec.95A＞G等致病性突變頻率升高，其它位點(diǎn)的頻率顯現(xiàn)出漸次降低的趨勢(shì)，表現(xiàn)出明顯的hitchhikingeffec

7、t和SelectiveSweep。說明G6PDKaipingc.1388G＞A、G6PDCantonc.1376G＞T、G6PDGaohec.95A＞G受到了優(yōu)勢(shì)選擇。
　　 本課題組以往的研究結(jié)果顯示了河南人群和山東人群的LDBlock和單體型結(jié)構(gòu)一致，由相同的7個(gè)SNPs位點(diǎn)構(gòu)成。本研究的廣東客家G6PD正常對(duì)照組構(gòu)成的LDBlock較小，分為兩個(gè)僅由3個(gè)和4個(gè)SNPs構(gòu)成的小LDBlock，與構(gòu)成河南和山東人群LDBloc