福建漢族人群葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)基因突變類型研究.pdf

1、目的：對(duì)福建地區(qū)漢族人群進(jìn)行葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）基因突變頻率進(jìn)行研究，豐富G6PD缺乏癥基因突變的資料及提高分子診斷水平，并豐富中國G6PD基因突變地域性的研究。
　　方法：⑴應(yīng)用運(yùn)用改良G6PD測(cè)定試劑盒（定量比值法）檢測(cè)G6PD酶活性異常樣本240例及G6PD酶活性正常樣本240例作為陰性對(duì)照，提取上述480例樣本基因組DNA。⑵采用阻滯突變系統(tǒng)-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（The amplification refract

2、ory mutation system，ARMS-PCR）方法擴(kuò)增G6PD酶活性異常的240例基因組DNA，結(jié)合瓊脂糖凝膠電泳分析判定G6PD基因組DNA G1388A、G1376T、A95G三個(gè)中國人常見突變位點(diǎn)的突變情況。⑶應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）加上基因測(cè)序的方法測(cè)定陽性組當(dāng)中酶活性異常而未檢出上述三個(gè)突變位點(diǎn)的標(biāo)本及240例陰性樣本，進(jìn)一步分析G6PD缺乏癥中其他可能的突變位點(diǎn)。⑷對(duì)召回的240患兒家長進(jìn)行問詢預(yù)防情況。

3、>　　結(jié)果：①應(yīng)用ARMS-PCR結(jié)合瓊脂糖凝膠電泳分析得出結(jié)果：G1376T突變118例，占49.2％;G1388A突變48例，占20%;A95G突變20例，占8.3%。②應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）加上基因測(cè)序的方法測(cè)定陽性組當(dāng)中酶活性異常而未檢出上述三個(gè)突變位點(diǎn)的標(biāo)本及240例陰性樣本，得出結(jié)果：C1024T突變18例，占7.5%;G392T突變16例，占6.7%;C1360T突變3例，占1.25%；G487A突變3例，占1.25%

4、；T1365-13C突變3例，占1.25%；T517C突變2例，占0.83%；C1311T、T1365-13C復(fù)合G871A突變4例，占1.67%；C1311T復(fù)合T1365-13C突變2例，占0.83%；C1311T、T1365-13C復(fù)合G392T2例，占0.83%；C1024T復(fù)合T1365-13C突變1例，占0.42%。240例陰性樣本中檢測(cè)出1例C1311T這一同義突變，其余239男童外顯子及側(cè)翼內(nèi)含子區(qū)域均無突變。③召回的2